萌发花粉细胞中线粒体基于微丝、微管的运动与分布的研究

植物细胞中动态线粒体以基于微丝的运动为主，静态线粒体的分布则与微丝、微管都有关系。花粉是一种特殊而重要的植物细胞，但是花粉细胞中线粒体运动、分布情况目前还不清楚，本课题拟以此为目标展开研究。首先构建线粒体特有的蛋白质-细胞色素氧化酶IV亚基（coxIV）与红色荧光蛋白（RFP）的融合基因，及在花粉中稳定表达的质粒，经农杆菌转染烟草，筛选出转基因植株，其花粉中的线粒体在萌发时被RFP标记。然后观察转基因烟草花粉萌发过程中线粒体的分布、运动变化规律，及与细胞核的空间位置关系，以判定在花粉细胞中是否存在核周线粒体和周质线粒体；进而利用微弹轰击法在花粉中瞬时表达mTalin-GFP标记微丝或MAP4-GFP标记微管，并采用相应的微丝、微管解聚药物处理，观察线粒体分布及运动状态的变化，分析微丝、微管与线粒体运动的关系。为进一步理解、研究植物线粒体的功能提供依据和支持。