CC3/TIP30调控肝癌细胞脂肪代谢的研究

Recurrence and metastasis of cancer cells, the main reasons of influencing the prognosis of liver cancer, are attributed to metabolic changes in liver cancer cells. And among them, aberrancy in lipid metabolism is one of the important reasons. Study of the molecular mechanisms of lipid metabolism in liver cancer will provide an important theoretical support for cancer diagnosis and therapy.Our previous results indicates that downregulation of CC3/TIP30, a tumor suppressor, can significantly increase the viability of cells through inhibiting apoptosis and enhance the metastasis of cells through promoting EMT process in liver caner. Recently, we found CC3/TIP30 might be involved in the regulation of lipid metabolism through microarray analysis. This study will detect products, enzymes and regulatory pathway of lipid metabolism in hepatocellular carcinoma cells. Then we will also explore the ability of cellular proliferation, adhesion, migration and invasion. Meanwhile, we will use vivo fluorescence technique to detect ability of hepatocellular carcinoma cells in animal models. Finally, we will analyze clinical cases to explore the role CC3/TIP30 in hepatoma cells in the process of lipid metabolism. From these, we will further understand the role of CC3/TIP30 in recurrence and metastasis and the mechanism of regulation. It will provide new strategies for diagnosis and therapy of liver cancer.

肿瘤的复发和转移是影响肝癌预后的主要原因，最新研究表明肝癌的复发和转移与肝癌细胞内代谢尤其脂肪代谢的改变密切相关。对肝癌细胞脂肪代谢机制的研究将为肿瘤诊断和治疗提供重要依据。CC3/TIP30是一种肿瘤抑制基因，我们前期研究结果显示下调CC3/TIP30可以增强肝癌细胞转移能力，同时基因芯片分析发现CC3/TIP30对脂肪代谢有显著影响，但作用机制尚不清楚。本研究将从检测肝癌细胞脂代产物、脂代相关酶和脂代调控通路的分子生物学实验；肝癌细胞增殖、粘附、迁移、侵袭能力检测和上皮细胞间质转化（EMT）标志蛋白检测等细胞生物学实验；应用活体荧光技术在动物模型中进行体内功能实验；以及在临床病例中进行相关性分析多层次全面探讨CC3/TIP30影响肝癌细胞脂肪代谢进而引起肝癌增殖和转移能力改变的机制，进一步促进我们对肝癌发生和转移的认识，为肝癌的诊断和治疗提供新靶点、新策略。

肝细胞癌是多发的恶性肿瘤之一，肿瘤脂肪代谢给快速增长的肿瘤细胞提供增殖所需要的能量，并且脂质的再生成已经成为HCC的重要标志。.我们发现使用RNA-Seq芯片分析发现，抑癌基因CC3/TIP30参与了肝癌细胞代谢特别是脂肪酸的代谢过程。下调CC3/TIP30的表达使肝癌细胞内脂滴增多以及甘油三酯的表达增多。使用Q-PCR和免疫印迹技术验证了脂肪酸代谢的调控枢纽SREBP1可以感应CC3/TIP30的表达变化并指导生脂酶FASN，SCD和的表达水平发生相应的改变。使用WesternBlotting和免疫荧光方法证明CC3/TIP30的表达增加了磷酸化AKT和 mTOR的表达，并使AKT通路被激活增加SREBP1的表达和核聚集。被激活的脂代谢通路指导生脂酶FASN，SCD表达增多，并使HCC细胞中脂滴和甘油三酯储存变多。.下调CC3/TIP30作用于SREBP1介导的脂代谢途径促进HCC细胞生长。在裸鼠皮下移植瘤模型中使用慢病毒干扰了CC3/TIP30和SREBP1的表达并根据实验分组了不同下调组合证明体内干扰SREBP1的表达会阻滞因CC3/TIP30缺乏引起的肿瘤生长增快，并且可以引起肿瘤组织中甘油三酯水平相同趋势的波动，通过免疫组织化学分析证明SREBP1以及生脂酶的FASN、SCD在裸鼠以内的表达量和CC3/TIP30的表达量成反比。.通过SREBP1和CC3/TIP30蛋白的表达组合分析可以更精准的评估HCC患者生存和预后。实验通过收集并结合患者临床资料比对分析，证明使用SREBP1和CC3/TIP30蛋白的组合表达量可以预测HCC患者的生存期和预后。.综上所述，CC3/TIP30负性调节肝癌细胞脂代谢。SREBP1是CC3/TIP30缺乏介导的促进脂肪生成的必要条件并通过Akt/mTOR通路进行调控。下调CC3/TIP30作用于SREBP1介导的脂代谢途径促进HCC细胞生长。通过SREBP1和CC3/TIP30 蛋白的表达组合分析可以更精准的评估 HCC 患者生存和预后。CC3/TIP30 调控SREBP1介导的脂代谢这个全新的机制可能成为治疗 HCC 的新靶标。