TRAb对心肌肥厚的影响及其机制研究

GD can cause severe cardiac dysfunctions, and myocardial hypertrophy is the most obvious pathological change in one of them. Now that the pathogenesis of the disease is thyroid stimulating hormone receptor antibodies (TRAb) binding to thyroid stimulating hormone receptors (TSHR) of thyroid cells, simulate of thyroid stimulating hormone (TSH), lead to excessive secretion of thyroid hormone (TH). However, it has been found that TRAb dose not increase in parallel with TH, and the level of serum TRAb is positively correlated with the damaging of cardiac function, and the previous study of the research group has confirmed the expression of TSHRs on the surface of myocardial cells. Thus, we speculate that TRAbs may combine with cardiac TSHRs, activate a series of signaling pathways, regulate the expression of related proteins and inflammatory factors, result in cardiac hypertrophy independently? This research is exploring the expression of inflammatory cytokines and the related pathways of cardiac hypertrophy by the establishment of TRAb positive cells and animal model, initially identify the independent pathogenic role and mechanism of TRAb in hyperthyroid heart disease. The present study will be the supplementary exploration to the mechanism of Graves induced myocardial hypertrophy.

Graves’病（Graves disease,GD）可引起严重的心功能障碍，尤以心肌肥厚最为突出。目前认为该病的发生机制为促甲状腺激素受体抗体（TRAb）结合于甲状腺细胞促甲状腺激素受体（TSHR），模拟促甲状腺激素（TSH）作用，致甲状腺素（TH）过度分泌导致。但有研究发现，Graves疾病中可出现TRAb与TH的非平行性升高，TRAb血清水平与心功能损伤成正相关，且课题组前期研究已证实心肌细胞表面TSHR的表达。由此我们推测，TRAb是否可能通过结合于心脏TSHR，激活一系列信号通路，调控相关蛋白及炎症因子表达，独立引起心肌肥厚？本课题拟通过建立TRAb阳性的细胞和动物模型，研究TRAb对心肌肥厚标志物、肥厚相关炎症因子及其通路分子表达的影响，初步明确TRAb在甲亢型心脏病中的独立致病作用及机制。本研究为Graves病诱发心肌肥厚发病机制的补充性探索。

Graves’病（GD）可引起严重的心功能障碍，尤以心肌肥厚最为突出。目前研究表明该病的发生机制为促甲状腺激素（TSH）结合于甲状腺细胞促甲状腺激素受体（TSHR）致使甲状腺素（TH）过度分泌，从而造成心肌损伤。但有研究发现，Graves疾病中可出现TRAb与TH的非平行性升高，TRAb血清水平与心功能损伤成正相关，而且在临床就诊患者中，也会有TRAb水平很高，而TH正常的患者，依然出现了心肌受损，而这种现象很难以已知的TRAb通过作用于甲状腺细胞使甲状腺激素分泌过多造成免疫损伤这一理论解释。由此推测，TRAb可能直接通过结合于心肌细胞表面的TSHR，激活相关通路，直接导致心肌舒张功能障碍。.本研究通过培养大鼠心肌细胞H9C2细胞株，采用外源性TRAb干预完成了TRAb对心肌细胞舒张蛋白活性及表达影响的研究，结果表明：当以高浓度（80 mIU/L）和长时间（36h）TRAb作用于H9C2细胞上的TSH受体时，可明显下调serca2a蛋白的表达。且明确了TRAb通过PKA/PLB信号通路调控serca2a，当加入通路PKA抑制剂H89，PKA下游的物质可有效被阻断。在体内实验中，通过Ad-TSHR-A 亚基免疫BALB/c 小鼠建立 GD 模型，相比对照组TRAb可显著下调心肌serca2a，Ryr2的表达；在心肌病理切片中，长期高浓度TRAb的作用，可使得心肌细胞形态异常，结构排列紊乱；通过超声诊断仪检测小鼠 IVSd 和 IVSs，LVIDd 和 LVIDs，LVPWd 和 LVPWs 均增大，而 HR、LVEF、LVFS 值减小；Elisa 测定血清炎症因子 IL-6、TNF-a 表达量明显上调，免疫组化显示 serca2a 与 RYR2 阳性区域面积呈下调趋势，上述变化与血清 TRAb 浓度呈现一定的浓度依赖性，在给予 MMI 治疗后可部分逆转。.研究结果提示当出现GD时，随着TRAb浓度增加及病程延长，TRAb 可通过调控心肌标志性蛋白serca2a 与RYR2、炎性因子IL-6、 TNF-a 的活性与蛋白表达量，从而引起心肌舒缩功能进行性下降。这也为目前临床中 TRAb 独立升高是否应予以治疗提供了依据。