银屑病MiRNAs-易感基因-细胞因子网络构建及竹黄颗粒的干预

Psoriasis vulgaris is a chronic recurrent disease which is characteristic of excessive proliferation of keratinocytes and auto-immune inflammation. According to our two previous projects supported by the NFSC, microRNAs, susceptibility genes and cytokines of psoriatic patients will have changes in expression, and interactional network may exist among them. On the base of system biology, previous experimental results and existing literatures, this proposal will employ sequence comparison and gene enrichment analysis to establish the interactional network of microRNAs-susceptibility genes-cytokines, which will be verified by clinical sample tests, genes expression and silencing, Q-pcr, western blotting.The investigations of the proposal will provide the research of outbreak and evolution of psoriasis with a new angle of view. In the meantime, the intervention action of Zhuhuang granule to the network will be studied using animal model which will bring us new interpretations of pathogenesis using the Chinese herbs to treat psoriasis.

银屑病是一种以角质形成细胞角化紊乱及免疫性炎症为特征的慢性反复发作性疾病。通过本项目组前期两个国家自然科学基金项目的研究发现：银屑病患者的microRNAs、易感基因和细胞因子均存在表达的变化，并且三者之间可能存在相互作用的网络。本项目组拟定以系统生物学理论为依据，以前期实验结果和现有文献为基础，利用序列比对和基因集富集分析等方法构建microRNAs-易感基因-细胞因子的相互调控网络；并通过临床样本检验，基因过表达、沉默以及Q-pcr和western blotting等方法对其进行验证，从而为银屑病发病、病情演变的研究提供一个全新的视角；同时，通过动物模型研究竹黄颗粒对此网络的干预作用，阐明中医药治疗银屑病的机制。

银屑病是一种以角质形成细胞角化紊乱及免疫性炎症为特征的慢性反复发作性疾病，而我院协定方剂竹黄颗粒治疗银屑病疗效显著，但作用机制不明限制了其进一步临床应用。申请人前期提出miRNAs-易感基因-细胞因子相互调控网络在银屑病发病和竹黄颗粒疗效发挥中具有关键作用，为证明该假说，本课题组以系统生物学理论为依据、搜集大数据库网络中银屑病相关的易感基因、细胞因子以及miRNA相关数据，分别基于验证数据和相关文献构建了两个miRNAs-易感基因-细胞因子相互调控网络；其后通过miRNA芯片、蛋白芯片和qPCR验证等技术手段分析了相关节点因子在银屑病皮损组织中的表达，其后又从分子、细胞、临床等多个水平证明了其中两条代表性的银屑病miRNA-易感基因-细胞因子轴——miR-99a/FZD5/8/Cyclin D1和IL-22/miR-330/CTNNB1通路在银屑病发病机制中的功能作用，最后又通过观察竹黄颗粒对“银屑病miRNA-易感基因-细胞因子”调控网络关键节点和miR-99a/FZD5/8/Cyclin D1、IL-22/miR-330/CTNNB1通路的影响，阐明竹黄颗粒剂介导MiRNAs-易感基因-细胞因子调控网络发挥作用。本项目首次利用系统生物学和生物信息学的研究方法进行银屑病MiRNAs-易感基因-细胞因子调控网络的构建，为银屑病发病机制、病情演变的研究提供一种全新的视角，为竹黄颗粒在银屑病治疗领域的应用提供了理论支撑，促进中医药现代化进程。