基于三叉神经通路的电针迎香穴治疗嗅觉功能障碍的作用机理研究

In recent years ,the focus of olfactory research is that the effects and mechanism of olfactory function are intervened by acupuncture therapy.Based on the therapeutical effects of olfactory malfunction treated by acupuncture stimulating Yingxiang point both at home and abroad,our project pay more attention to the relationship between trigeminal and olfactory nerve endings with molecular mechanism .Firstly,we use the fMRI method to observe the activated effects of relative brain areas by electronic acupuncture stimulating Yingxiang point.Then,we make the olfactory dysfunction model by severing the trigeminal nerve. We furtherly investigate the olfactory behaviour,olfactory electrical level,olfactory mucosa, nervous peptides, apoptosis and regeneration of ORN by olfactory maze ,electros.-copy,immunohistochemistry, westernblot、RT-PCR methods.The aim of our project is to confirm the scientific hypothesis that"Acupunctur stimulating the Yingxiang point can affect the apoptosis and regeneration of ORN,recorrect the olfactory dysfunction through the trigemial pathway."We want to resolve the key scientific problem that the mechanism and pathway by which Yingxiang point can affect the olfactory function .Our project will certainly provide both theoretic and experimental evidences for the clinical treatment of olfactory malfunction by acupuncture therapy.

针刺对嗅觉功能的干预效应和机制是近些年嗅觉研究的焦点之一。本项目以国内外电针迎香穴治疗嗅觉功能障碍的临床疗效为基础，选择嗅粘膜的三叉神经分支与嗅神经重叠分布的解剖学特点及其相互作用的分子机制为切入点，首先通过fMRI技术观察电针迎香穴对人体相关脑区的激活效应，进一步采用迷宫实验、透射电镜、免疫组化、westernblot、RT-PCR等方法，观察电针迎香穴对三叉神经阻断模型的嗅觉障碍模型大鼠的嗅觉行为学、嗅觉电位、嗅粘膜形态、神经肽类物质、ORN凋亡和再生等指标的干预效应。以期验证"针刺迎香穴能够通过三叉神经通路，影响嗅粘膜ORN的凋亡和再生，从而改善嗅觉功能障碍"的理论假说，解决迎香穴影响嗅觉功能的作用途径和干预机制这一关键科学问题，并为针灸治疗嗅觉功能障碍的临床应用提供理论和实验依据。

本项目按照计划书要求，如期进行了基于三叉神经通路的电针迎香穴治疗嗅觉功能障碍的作用机理研究。项目选择嗅粘膜的三叉神经分支与嗅神经重叠分布的解剖学特点及其相互作用的分子机制为切入点，采用三叉神经阻断的方法，首先通过fMRI技术完成了观察电针迎香穴对人体相关脑区的激活效应，研究结果证实电针迎香穴前后多个脑区静息态功能连接发生改变，其中右侧海马与右侧枕上回静息态功能连接增强，激活强度较电针迎香穴前增强，初步证实针刺迎香穴能够通过三叉神经通路，能够影响嗅觉相关脑区的激活状态，其中以海马区最为显著；继而采用迷宫实验、病理学检查、超微结构检测、免疫组化、Westernblot、RT-PCR 等方法，开展了电针迎香穴对三叉神经阻断模型的嗅觉障碍模型大鼠的嗅觉行为学、嗅觉电位、嗅粘膜形态、神经肽类物质、ORN 凋亡和再生等指标的干预效应研究，研究结果证实电针迎香穴能够显著良性调节嗅觉障碍大鼠行为学及嗅粘膜电位，改善嗅觉障碍大鼠嗅上皮的嗅细胞和基底细胞的核层结构，改善嗅粘膜超微结构中染色质分布、胞浆内、线粒体、粗面内质网核糖体等结构，良性调节嗅觉障碍大鼠嗅粘膜区三叉神经与ORN产生的SP、CGRP、NKA等神经肽类物质的表达，良性调节嗅觉障碍大鼠嗅粘膜NCAM、OMP、FGF2、IGF-1、Ki-67、FGF2R、IGF-1R等ORN再生相关分子的表达，且以上干预效应的产生均依赖于三叉神经通路的完整性，初步阐明了针刺迎香穴是通过三叉神经通路，影响嗅粘膜ORN的凋亡和再生，从而改善嗅觉功能障碍的作用机制，解决了迎香穴影响嗅觉功能的作用途径和干预机制这一关键科学问题，并为针灸治疗嗅觉功能障碍的临床应用提供了理论和实验依据。