牡荆素B1抗脑缺血/再灌注氧化损伤的作用及机制研究

Oxidative stress promotes the progress of cerebral ischemia/reperfusion injury.This study first found that vetexin B1 can significantly protect rats from cerebral ischemia/reperfusion injury through inhibiting NADPH oxidase 2(NOX2) and NOX4 and increasing miR-92b level. Base on the above results, we first probe into the role in against cerebral ischemia/reperfusion injury and its underlying mechanism from the following aspects:1)to construct the cerebral ischemia/reperfusion model in rats and combination with drugs intervention, NOX RNA interference, miR-92b and other miRNAs agomirs intervention, and measure the brain infarct volume and the expression of NOX2 or NOX4 or others to preliminarily determine the effects of vitexin B1 on against cerebral ischemia/reperfusion injury and its underlying mechanism;2)To construct the hypoxia/reoxygenation model in neuron cells and combination with NOX gene silencing ,miR-92b and other miRNAs mimics intervention and Luciferase reporter gene technology, and measure the related indices to illustrate the neuroprotection effects of vitexin B1 and its underlying mechanism.This study will provide new theoretical basis for cerebral ischemia/reperfusion oxidative damage prevention and treatment.

氧化应激促进了脑缺血/再灌注损伤。本项目预实验首次发现牡荆素B1能显著减轻大鼠脑缺血/再灌注（IR）损伤，抑制NADPH氧化酶2 (NOX2)和NOX4表达, 升高miR-92b水平。基于上述结果，我们率先从以下方面探讨牡荆素B1抗脑缺血/再灌注氧化损伤的作用及机制：① 建立大鼠脑IR模型，结合药物干预、NOX RNA干扰或miR-92b等 agomir干预，检测脑梗死体积、NOX2、NOX4表达等指标，初步确定牡荆素B1抗脑缺血/再灌注损伤作用及机制；② 建立神经细胞低氧/复氧损伤模型，结合药物干预、NOX基因沉默、miR-92b等 mimics干预及荧光素报告基因技术，检测上述相关指标, 阐明牡荆素B1神经保作用及机制。该研究将为脑缺血/再灌注氧化损伤的防治提供新的理论依据。

缺血脑卒中是一类具有高致残、致死率的中枢神经系统疾病，主要由各种原因（动脉狭窄、血栓等）引起的局部脑组织供血不足所致。采用溶栓等技术使阻塞的脑血管恢复血流供应是目前临床的主要救治方法，然而，血供的恢复并不能使受损的组织立即得到逆转，相反，还会形成继发性的二次损伤，即再灌注损伤。多种因素参与了脑缺血/再灌注损伤，其中氧化应激发挥了重要作用，加剧了脑损伤，因此寻找能对抗氧化应激损伤的药物对缺血脑卒中的救治具有十分重要的现实意义。本项目采用大鼠脑IR模型及神经细胞低氧/复氧损伤模型模拟缺血脑卒中，结合药物干预、NOX基因沉默、miR-92b、miR-532、miR-652等 agomir或mimics干预及荧光素报告基因技术进行基因功能或药理研究。本项目研究发现：① 缺血再灌后，大鼠脑组织中miR-92b、miR-532、miR-652的表达水平显著下调，NOX2、NOX4的表达水平显著上调，氧化应激损伤加剧。②生物信息学分析表明miR-92b是NOX4的靶miRNA, miR-532、miR-652是NOX2的靶miRNA。③miR-92b、miR-532、miR-652 mimic转染实验及荧光素酶报告基因实验证实miR-92b基因靶向调控NOX4, miR-532、miR-652靶向调控NOX2；④牡荆素B1能显著减轻大鼠脑缺血/再灌注（IR）损伤，抑制NADPH氧化酶2 (NOX2)和NOX4表达, 升高miR-92b、miR-532、miR-652水平 。本项目将为脑缺血/再灌注氧化应激损伤防治提供新的理论依据。在该项目的资助下，在Acta Medica Mediterranea等国际有影响力的杂志上共发表SCI论文多篇，培养硕士研究生1名。在后续研究中，将继续标注本项目资助。