hnRNP A2/B1在脑缺血再灌注损伤中的表达与作用研究

近年来脑血管病已经高居我国城乡居民死亡原因第二位，但其发病机制至今尚未完全阐明。文献调研发现真核基因mRNA前体的剪接调控可能在脑缺血再灌注损伤中起一定作用，而核不均一性核糖核蛋白(hnRNP))很可能与此有关。我们前期采用外显子芯片研究小鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型中全基因水平和外显子的表达水平，发现hnRNP A2/B1表达上调，预实验采用免疫组化发现神经元胞核内的hnRNP A2/B1不仅上调且从胞核易位至胞浆甚至突起，提示脑缺血再灌注时剪接调节过程可能与脑损伤密切相关。故本项目拟对hnRNP A2/B1与脑缺血再灌注损伤之间的关系进行深入研究，试图鉴定脑缺血再灌注损伤中hnRNP A2/B1自身及与靶标mRNA之间的剪接调控模式，研究剪接调节在脑损伤发生、发展中的作用，旨在回答可变剪接是否参与脑缺血再灌注损伤，预期对脑缺血再灌注损伤新机制有所揭示，并为相关疾病的治疗提供参考资料。

近年来脑血管病已经高居我国城乡居民死亡原因第二位，但其发病机制至今尚未完全阐明。文献调研发现真核基因mRNA前体的剪接调控可能在脑缺血再灌注损伤中起一定作用，而核不均一性核糖核蛋白(hnRNP)很可能与此有关。本项目通过对hnRNP A2/B1的深入研究，试图进一步阐明脑缺血再灌注损伤的机制。我们建立了大鼠脑缺血再灌注损伤模型，并对hnRNP A2/B1在大脑中的表达水平进行检测，发现hnRNP A2/B1表达上调并从胞核易位至胞浆甚至神经突起，提示脑缺血再灌注时剪接调节过程以及神经细胞突起中的翻译事件可能与脑损伤及其修复密切相关。我们还建立了细胞的氧糖剥夺模型模拟神经元研究hnRNP A2/B1在缺血再灌注后早期的调控机制；利用生物信息学工具预测可能与大鼠hnRNP A2/B1相互作用的靶标RNA；同时还制备了hnRNP A2、B1的多克隆抗体，并对其特异性进行了鉴定，为阐明hnRNP A2/B1参与脑缺血再灌注损伤的调控机制提供了参考。