质粒介导AmpCβ-内酰胺酶新基因功能及整合子在AmpC基因水平传播中的作用

近10年来质粒介导的AmpC酶的新基因不断涌现，但对其功能研究的速度远落后于发现基因的速度，尤其对AmpC耐药基因水平转移机制研究不足。本课题组前期工作已发现3个新基因，并发现大肠埃希菌的多重耐药现象可能是整合子携带着多个重组的基因盒插入到接合质粒中导致的,由此推测产质粒介导的AmpC的肠杆菌科细菌呈现严重的多重耐药现象有可能是整合子携带着多个重组的基因盒插入到接合质粒中导致的。为此,我们以临床上最常见的肠杆菌科细菌作为研究对象，收集非重复的临床分离菌株，进行产质粒介导AmpC基因的表型筛选，基因扩增与克隆，序列分析，新基因的原核表达，表达蛋白耐发型药性测定；并对3类整合子基因盒可变区进行核苷酸序列测定，设计整合子特异性探针进行Southern杂交，以期阐明质粒介导AmpC基因的特征和多重耐药性与整合子传播的相关性，为遏制耐药基因的传播及研究新的抗菌药物作用靶点提供科学依据。