HIF-1α通过miR-200a调节新疆维汉民族鼻息肉VEGF表达和血管生成

The pathogenesis of nasal polyps is not clear. Studies have reported, hypoxia inducible factor -1 alpha (factor-1 α hypoxia-inducible, HIF-1 α) is the regulation of angiogenic factors (Vascular endothelial growth factor, VEGF) is the key factor, expression and the swelling of solid tumor VEGF closely. Another study reported, HIF-1 α there is high expression in nasal polyps, and VEGF can be a series of miRNA regulation. Therefore, there may be a molecular event HIF-1 alpha modulation of VEGF production and nasal polyps and the development of miRNA in nasal polyps we speculate. In order to verify this hypothesis, we in the pre experiment detected the expression of HIF-1 α and VEGF in nasal polyps associated with screening, to miR-200a may be the research target for the regulation of VEGF expression. Based on this, this study intends to detect nasal polyps of HIF-1 α, VEGF and miR-200a expression and in vitro and animal experimental study of HIF-1 α can by adjusting the miR-200a control of VEGF expression and regulation of nasal polyp formation. This study intends to elucidate the molecular mechanism of nasal polyps from the miRNA regulation angle, provide new targets for drug screening, for nasal polyps and small molecule drugs targeting treatment and provide a theoretical basis and experimental foundation.

鼻息肉发病机制尚不明确。缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）是调节促血管生成因子（VEGF） 的关键因子，与各肿实体瘤内VEGF 的表达密切相关。HIF-1α在鼻息肉组织中也存在高表达，并且VEGF 能够被一系列miRNA调控。因此推测鼻息肉中可能存在HIF-1α通过miRNA 调节VEGF 生成和鼻息肉发展的分子事件。为验证该假设，在预实验中检测到鼻息肉组织中HIF-1α和VEGF 的表达具有相关性，筛选到miR-200a 可能是调节VEGF 表达的研究靶点。以此为基础，本研究拟检测鼻息肉中HIF-1α、VEGF 和miR-200a 表达并通过离体和动物实验探讨HIF-1α能否通过调节miR-200a 控制VEGF 表达进而调节鼻息肉生成。本研究拟从维汉民族对miRNA 调控的角度阐明鼻息肉发病相关的分子机制，为新药筛选提供新的研究靶点，为鼻息肉小分子药物靶向治疗提供理论依据和实验基础。

鼻息肉是由上呼吸道感染引起，发生机制尚未明确的长期慢性炎症疾病。HIF-1α是调节促血管生成VEGF的关键因子，与各肿实体瘤内 VEGF 的表达密切相关。围绕HIF-1α-miR-200a-VEGF调控关系，我们对鼻息肉的发病机制进行了相关研究。针对鼻-鼻窦炎伴息肉（CRSwNP）和鼻-鼻窦炎不伴息肉（CRSsNP）鼻黏膜组织样本中的miRNA表达谱，我们通过生物信息学方法进行差异表达miRNA的筛选、预测并注释差异表达miRNA的靶基因及其通路 。观察到在伴有鼻息肉的样本中，miR-200a-3p的表达水平显著低于不伴有鼻息肉的慢性鼻窦炎患者，并通过TargetScan预测并筛选得到miR-200a-3p调控的靶基因VEGF。miR-200a-VEGF二者的相关性在后续大样本中的实时荧光定量PCR(qRT-PCR) 实验结果中得以验证。而在测序及qRT-PCR中所得到的数据，我们也观察到汉族和维族鼻-鼻窦炎伴鼻息肉之间miR-200a的表达量存在显著差异，因此将miR-200a过表达载体转染至汉族鼻-鼻窦炎伴鼻息肉原代细胞，将miR-200a抑制表达载体转染至和维族鼻-鼻窦炎伴鼻息肉原代细胞，并对原代细胞进行低氧诱导提高HIF-1α蛋白表达水平，观察到与血管形成的相关基因如VEGF, GTPase等出现了相关变化，并对细胞在增殖和血管形成方面的表型产生相应的调控。除上述HIF-1α-miR-200a-VEGF调控关系的阐释和发现以外， 我们在测序数据中也观察到适合进行后续研究的标记物和信号通路，如miR-144-5p、miR-411-3p、miR-4492和miR-127-3p等，及其结合的IL-10，RYBP，TNF-a及TNFAIP3相关炎症信号通路，该部分内容的研究正在深入的开展当中。综上，HIF-1α在缺氧的情况下被上调，从而引起miR-200a的下降，解除了后者对VEGF的抑制作用，导致进一步加强了息肉组织的增殖及血管形成能力。围绕HIF-1α-miR-200a-VEGF的研究以及其它标记物的研究，将为miR-200a等小分子RNA成为鼻-鼻窦炎伴鼻息肉新的诊断和治疗靶点，同时为汉族和维族在鼻-鼻窦炎伴鼻息肉的精准诊断及治疗提供了理论基础。