骨桥蛋白通过miR-200a调节鼻息肉VEGF表达和血管生成

The pathogenesis of nasal polyps has not been completely undertood. We recently found increased expression of osteopontin(OPN) in inverted papilloma is associated with VEGF, suggesting OPN is able to promote VEGF production. Moreover, OPN has been reported to be significantly upregulated in nasal polyps, and VEGF expression can be regulated by a lot of microRNA. Taken together, Therefore, we thus suggested OPN might regulate VEGF production that contributed to the formation of nasal polyps through modulating microRNA.To prove it,we preliminarily examined the expression of OPN and VEGF in nasal polyps and found both of them were significantly upregulated. Moreover, we identified miR-200a as a candidate microRNA which targeting VEGF as suspected. Based on these findings, we plan to examine the expression of OPN, VEGF and miR-200a in nasal polyps and investigate wthether OPN is able to modulate VEGF production through miR-200a in vitro and in vivo. This study aimed to clarify the molecular mechanisms of nasal polyps from miRNA regulation and try to establish effective treatment, which is of great science and clinical utility.

鼻息肉发病机制尚不完全清楚。本课题组近期研究证实，骨桥蛋白（osteopontin，OPN）是调节VEGF的关键因子，与鼻腔内翻性乳头状瘤内VEGF的表达密切相关。另据研究报道，OPN在鼻息肉组织中也存在高表达，并且VEGF能够被一系列miRNA调控。因此，我们推测鼻息肉中可能存在OPN通过miRNA调节VEGF生成和鼻息肉发展的分子事件。为验证该假设，我们在预实验中检测到鼻息肉组织中OPN和VEGF的表达具有相关性，筛选到miR-200a可能是调节VEGF表达的研究靶点，以此为基础，本研究拟检测鼻息肉中OPN、VEGF和miR-200a表达并通过离体和动物实验探讨OPN能否通过调节miR-200a控制VEGF表达进而调节鼻息肉生成。本研究有望从miRNA调控的角度阐明鼻息肉发病相关的分子机制，筛选新的研究靶点并据此建立更有针对性的治疗策略，因此具有重要的科学意义和潜在的临床应用价值。

鼻息肉发病机制尚不完全清楚。本课题检测了鼻息肉组织中嗜酸性粒细胞浸润情况、OPN的表达及OPN对组织中嗜酸性粒细胞浸润的调节作用；检测了国人慢性鼻窦炎鼻息肉患者的病理表型特征和黏蛋白MUC5AC及转录因子FoxA2的表达及二者之间的调节关系；检测了国人慢性鼻窦炎鼻息肉患者的B细胞的浸润情况及Bcl-6+ Tfh细胞对鼻息肉组织B细胞簇的可能调节作用；评估了慢性鼻窦炎鼻息肉患者差异表达的miRNA；重点分析了鼻息肉中OPN、VEGF和miR-200a表达之间的关联性，并通过离体和动物实验证实OPN通过调节miR-200a控制VEGF表达进而调节鼻息肉生成。.研究发现，慢性鼻窦炎鼻息肉患者存在显著的嗜酸性粒细胞浸润，鼻息肉组织中OPN基因和蛋白表达增高，二者之间存在正向关联性，通过离体细胞培养和趋化实验研究，证实OPN能够促进嗜酸性粒细胞趋化。研究证实了伴或不伴鼻息肉的慢性鼻窦炎患者均存在MUC5AC表达增高，FoxA2的表达降低，MUC5AC表达与转录因子FoxA2的表达存在负相关。通过克拉霉素治疗能够改善慢性鼻窦炎患者的鼻部症状，并且证实克拉霉素治疗能够导致FoxA2表达的增高和MUC5AC表达的抑制。另外，研究还证实鼻息肉组织中Bcl-6的表达与对照的鼻黏膜组织相比存在显著的增高，Bcl-6+CD4+ T细胞（Tfh细胞）在鼻息肉组织中增加，鼻息肉组织中IgE、IgA蛋白浓度和生发中心样的结构（依据检测B细胞的标记物CD20）的形成存在正相关；初步证实了Bcl-6和B细胞团在慢性鼻窦炎发病中可能存在着重要作用。研究最后证实了鼻息肉组织中OPN表达增高，VEGF表达增高。通过OPN体外刺激离体培养的HUVEC，发现miR-200a和VEGF表达增高，同时血管形成实验阳性，而给与了miR-200a拮抗剂后血管形成受到抑制；证实了OPN/miR-200a轴在VEGF表达和慢性鼻窦炎发病中可能存在着重要作用。为鼻息肉的精准治疗提供了有效的干预靶点。