HSF1通过调控自噬减轻内毒素血症炎症因子释放的机制研究

Heat shock factor-1 (HSF1) and autophagy both play a protective role in endotoxemic mice. Our recent study found that higher levels of inflammatory cytokines and lower autophagy activity were detected in HSF1-/- endotoxemic mice compared to HSF1+/+ endotoxemic mice. Bioinformatics analysis showed that ATG12, Beclin1 and other autophagy related gene promoter region containing the heat shock element. Based on the above findings, we presume that HSF1 is involved in attenuating the release of inflammatory cytokines in endotoxemic mice through regulating autophagy. In order to verify this hypothesis, we plan to investigate the role and molecular mechanism of HSF1 on regulation of autophagy during endotoxemia by western blot, QRT-PCR, RNA interference, EMSA, Chip, heat shock element site directed mutagenesis, luciferase reporter gene assay in HSF1-/- gene knockout mice, peritoneal macrophages and RAW264.7 macrophages. All these are expected to reveal the endogenous molecules protection mechanism of sepsis , and provide a new strategy for prevention and treatment of sepsis.

热休克因子1（heat shock factor 1，HSF1）和自噬在内毒素血症的小鼠中均发挥保护作用。我们近期研究发现，与HSF1+/+野生型小鼠比较，HSF1-/-基因敲除的内毒素血症小鼠血清炎症因子水平更高，而肺脏等组织自噬水平更低。生物信息学分析发现ATG12，beclin1等重要自噬相关基因启动子区域含有受HSF1调控的热休克元件。基于上述研究基础，我们提出HSF1通过调控自噬，进而影响内毒素血症小鼠炎症因子释放的假设。针对上述假设，采用HSF1-/-基因敲除小鼠、腹腔原代巨噬细胞以及RAW264.7巨噬细胞株，通过WB、QRT-PCR、基因转染、RNA干扰、EMSA、Chip、热休克元件定点突变、荧光素酶报告基因实验等先进研究手段，探讨内毒素血症时HSF1调控自噬的作用及分子机制，旨在揭示脓毒症时内源性分子保护机制，并为临床上脓毒症的防治和治疗提供新的策略。

热休克因子1（heat shock factor 1，HSF1）和自噬在内毒素血症的小鼠中均发挥保护作用。我们近期研究发现，与HSF1+/+野生型小鼠比较，HSF1-/-基因敲除的内毒素血症小鼠血清炎症因子水平更高，而肺脏等组织自噬水平更低。生物信息学分析发现ATG12，beclin1等重要自噬相关基因启动子区域含有受HSF1调控的热休克元件。基于上述研究基础，我们提出HSF1通过调控自噬，进而影响内毒素血症小鼠炎症因子释放的假设。针对上述假设，采用HSF1-/-基因敲除小鼠、腹腔原代巨噬细胞以及RAW264.7巨噬细胞株，通过WB、QRT-PCR、基因转染、RNA干扰、EMSA、Chip等研究手段，探讨内毒素血症时HSF1调控自噬的作用及分子机制，旨在揭示脓毒症时内源性分子保护机制，并为临床上脓毒症的防治和治疗提供新的策略。通过研究我们发现HSF1可以转录调节自噬相关基因 10 (ATG10) 参与自噬过程。与siRNA-HSF1单独转染比较，在 siRNA-HSF1和 ATG10 共转染的RAW264.7 巨噬细胞中，炎症因子释放明显减少。此研究表明HSF1通过调控ATG10参与自噬并减轻脓毒症时炎症因子的释放， 因此以HSF1-ATG10-自噬为信号通路的靶向治疗将为脓毒症时减少炎症因子释放提供治疗靶点。