HIF-2α-VEGF-Notch信号通路在HIFU残留肝癌血管新生中的作用机制研究

The problem of residual hepatocellular carcinoma (HCC) after High intensity focused ultrasound (HIFU) has been observed in many clinical centers. However, the rapid progression of residual cancer seriously affect the treatment effect of HIFU. The mechanism of rapid progression of the residual tumor after HIFU is poorly characterized. Our pervious study demonstrated the angiogenesis stimulated by VEGF produced by altered HepG2 cells after HIFU treatment without increased expression of hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1) and revealed HIF- - 1 independent regulation of VEGF may play an important role in increased VEGF expression and angiogenesis. Recent studies have found that HIF-2α-VEGF-Notch pathway is a major regulator of angiogenesis. So, by up-regulating and down-regulating expression of HIF-2α and VEGF observe the angiogenesis of residual hepatocellular carcinoma after HIFU ablation in vitro and in vivo.Our research would reveal the mechanism of rapid progression of the residual tumor after HIFU and provide new thinking for clinical prevention and treatment.

高强度聚焦超声（HIFU）治疗肝癌存在癌组织残留的缺陷，而残留癌快速进展是影响肝癌HIFU疗效的重要原因。项目组前期研究发现，残留癌中VEGF表达升高导致血管生成增多是其快速进展的重要机制；HIF-1α作为VEGF的高效调控因子，在其中发挥的作用有限，而HIF-2α在HIFU残留癌中升高趋势与其快速进展时间较一致，而新近发现HIF-2α-VEGF-Notch通路是一条重要的促血管生成途径，参与多种血管相关疾病的发生发展，但目前相关研究尚未涉及肝癌的残留和复发方面，更无与HIFU残留肝癌相关的研究报道，因此，本研究拟筛选多株经HIFU不完全消融后快速增殖的肝癌细胞作为亚系并建立其动物模型，采用RNAi沉默及基因过表达技术等，深入探讨HIF-2α-VEGF-Notch通路在HIFU残留癌快速进展中，对肿瘤血管新生的作用，以期为HIFU治疗肝癌后残留癌快速进展机制研究方面作一些探索性工作。

肝癌在我国的发病率较高，危害性大。HIFU以其无创、精确、高效率为特点在临床上应用越来越广。我院HIFU中心已完成约1500例中晚期肝癌的HIFU治疗，取得了满意的临床效果，但同时我们也发现HIFU存在一些缺陷，其中较明显的是HIFU治疗后残留癌可快速进展，在短期内形成肝内外转移。我们前期工作发现HIF-1α、HIF-2α和VEGF高表达导致的血管生成增多是残留肝癌发生快速发展的重要原因。但是HIF-1α与VEGF表达并不完全一致，HIF-1α在HIFU治疗14天后明显减少，而VEGF的表达持续增强，故除HIF-1α外HIF-2α有可能参与HIFU残留血管新生的调控。.首先我们根据探索确定获得稳定残留癌细胞株的高频度聚焦超声使用强度，并检测残留细胞株较未处理细胞具有增殖能力、热耐受能力，能促进血管形成；我们通过1%氧分压的低氧培养箱处理细胞，成功获得更好的低氧诱导因子变化趋势；其次通过慢病毒转染技术抑制HIF-2α、VEGF研究其作用机制，发现HIF-2α对VEGF有促进作用；最后我们通过建立小鼠肝脏原位癌动物模型获得肿瘤标本再次验证其作用机制，再次证明实验数据的正确性。.我们发现HIF-2α能够调控VEGF及促进血管新生，HIF-2α是HIFU治疗后残留肝癌血管新生的调控因子。