联合FD-OCT评估let-7b调控巨噬细胞自噬影响动脉粥样硬化斑块稳定性机制的研究

Atherosclerosis (AS) is the main cause of coronary heart disease and stroke. There is still a large residual risk is existing in the base of statin and other anti-AS treatments. Our studies using optical coherence tomography (OCT) in vivo to continuous identify plaque features in patients with coronary artery disease suggest that macrophages are an independent predictor in AS progression. However, there is still lack of ideal imaging techniques for the quantitative and qualitative assessment of macrophage in vulnerable plaques in vivo. Our research will combine FD-OCT with IVUS to consecutive assess plaque features in vivo, the target region was selected to calculate the macrophage content of vulnerable plaques by using the variance standard deviation (NSD) through the OCT-IVT analysis software, and to clarify its accuracy and practicality through pathology and molecular biology experiments. We stabilize the AS plaque by interfering with the functional status of macrophages and provide a new imaging basis for the new target and direction to AS therapy.

动脉粥样硬化(AS)是冠心病及脑卒中发生的主要病因，在现有他汀等药物抗AS治疗下仍有较大残余风险。我们中心应用频域光学相干断层成像技术(FD-OCT)在体连续识别冠心病患者斑块特征的研究提示，巨噬细胞仍是AS进展的独立预测因素。然而目前易损斑块内巨噬细胞浸润的定性及定量的评估方法仍需进一步完善。本课题通过联合应用FD-OCT及血管内超声(IVUS)在体连续评估斑块特征，首次通过OCT-IVT分析软件，选取目标区域应用规范化标准差(NSD)算法精确计算出易损斑块中巨噬细胞含量，并通过病理学及分子生物学实验阐明其准确性与实用性，通过干预巨噬细胞的功能状态稳定AS斑块，为治疗AS的新靶点和方向提供新的影像学依据。

动脉粥样硬化(AS)是引起冠状动脉血管腔狭窄或阻塞，造成心肌缺血、缺氧或坏死乃至引起死亡的主要病因，现有的调脂、抗血小板等药物治疗等多种抗AS策略已用于临床，但患者预后及远期生存情况仍未得到完全改善。既往研究证实巨噬细胞的免疫激活是AS发病机制中的一个核心过程，巨噬细胞自噬水平增加促进巨噬细胞向M2型转化，从而可以稳定AS斑块，但是巨噬细胞在AS发生发展中的作用及调控机制目前尚不清楚。本课题发现研究发现let-7b在冠心患者中明显上调，并在AS过程中能够明显调控巨噬细胞极化方向及影响炎性因子的分泌，并通过荧光素酶实验检测let-7b可靶向调控TGF-βR1参与下游分子机制调控，同时其上游有长链非编码RNA NEAT1参与let-7b对巨噬细胞功能调控。我们通过建立新西兰白兔颈动脉球囊损伤AS模型;兔自体髂骨来源的CD11+单核细胞提取及体内回输let-7b;并应用FD-OCT、IVUS检测，明确斑块特征，分析易损斑块的纤维帽、管壁重构、斑块破裂及巨噬细胞的分布等情况;选取ROI区域通过OCT-IVT软件分析OCT图像，并将OCT成像结果与免疫组化结果进行比较。在冠心病患者中，将基线及12个月随访时行FD-OCT及IVUS检测;应用Light Lab公司的图像分析软件对患者的罪犯病变处的斑块进行分析;同时用ELISA检测患者的血清中巨噬细胞相关炎性因子表达水平。综上，我们的研究以FD-OCT联合IVUS为影像学检测手段，检测AS斑块巨噬细胞自噬及极化方向，通过细胞实验、动物实验、人体验证等方法，全面阐明了let-7b靶向调控AS患者巨噬细胞极化的具体分子机制 ，为临床治疗冠状动脉粥样硬化提供了靶点。