PSMA胞质尾端激活PI3K/PTEN/Akt途径上调HIF-1a促进前列腺癌迁移演进的分子机制研究

前期研究中，我们发现前列腺特异性膜抗原（PSMA）不单是一种高特异性瘤标，其在前列腺癌细胞的增殖、转移和侵袭中还具有促进作用，但PSMA作为一种跨膜蛋白是如何参与促进作用的分子机理目前还不清楚。PSMA胞质尾端具有多肽酶的功能，其可能通过激活PI3K/PTEN/Akt途径来发挥作用，而我们前期的研究发现抑制PSMA表达后前列腺癌细胞中HIF-1α含量明显下调，同时PI3K/Akt途径可以激活关系肿瘤迁移与转移的HIF-1α因子。因此，我们推测：PSMA的胞质尾端通过泛素化将Akt转移到胞膜，从而激活Akt途径来上调HIF-1a，促进前列腺癌迁移与侵袭。本项目拟在以往的研究基础上，利用RNA沉默、EMSA及核转录因子诱骗等方法，研究PSMA、PI3K/PTEN/Akt通路及HIF-1α三者的关系，验证我们的推测，为理解PSMA功能及其调控前列腺癌迁移和转移的分子途径提供实验依据。

前列腺特异性膜抗原（PSMA）不单是一种高特异性瘤标，其在前列腺癌细胞的增殖、转移和侵袭中还具有促进作用，但PSMA作为一种跨膜蛋白是如何参与促进作用的分子机理目前还不清楚。PSMA胞质尾端具有多肽酶的功能，其可能通过激活PI3K/PTEN/Akt等途径来发挥作用。本项目在以往的研究基础上，以高表达PSMA的前列腺癌细胞株LNCap，通过RNAi技术沉默PSMA基因后，结合空白处理组、阴性对照组和抑制PSMA组，在有/无LY294002条件下检测细胞功能和Akt信号通路的结果，发现与阴性对照组和空白组相比，处理组p-AKt（Ser473）表达量显著降低，三组细胞在加入LY294002后，p-Akt的表达量都处于低水平，细胞功能检测发现细胞的增殖、转移及存活能力均下降。最后证实PSMA胞质尾端可以PI3K/AKT通路对前列腺癌细胞的增殖、转移、存活进行调控。另外，我们以沉默PSMA后，检测细胞P38/MAPK信号通路及检测细胞功能，Western blot及免疫荧光检测均发现抑制PMSA表达后与阴性对照组及空白对照组相比，P38表达下降约40%，加入P38抑制剂SB203582的处理组中P38均低表达，细胞功能检测发现细胞的增殖、转移及存活能力均下降，证实了PSMA通过激活P38/MAPK这一新的分子通路促进前列腺癌细胞的增殖、转移及存活。最后，通过Western blot及免疫荧光共聚焦技术试验测定自噬激活蛋白MAP1S在野生小鼠及在前列腺特异性PTEN基因敲除小鼠上构建的前列腺上皮细胞癌（PTEN-/-,PIN）模型及前列腺腺癌细胞（PTEN-/-,PIN）模型上的表达情况，通过免疫组化测定其前列腺癌患者中的表达情况，同时联系前列腺癌患者预后数据进行定量半定量分析，证实了自噬激活蛋白的MAP1S低表达及自噬抑制蛋白LRPPRC的高表达引起自噬缺陷往往与提示前列腺癌预后不良。有关本研究将为理解PSMA功能及其调控前列腺癌迁移和转移的分子途径提供理论依据，为前列腺癌治疗提供干预的新靶点，并为寻找新型的抗前列腺癌药物提供研究基础。