转铁蛋白介导重组IP10基因禽流感病毒特异性抗肿瘤研究

Oncolytic virus therapy is a new line of anti-cancer treatment in recent ten years，but insufficient antitumor effect and targeted deficiency hampered its implementation. IP10(IFN inducible protein-10) gene can stimulate the proliferation of T cells, mediate thymus dependent antitumor effect, induce antitumor angiogenesis and destroy tumor vascular. In our study, IP10 gene and tumor-specific promoter hTERT were recombined in one strain avian influenza virus (AIV) which had good oncolytic activity and was not pathogenic to mammals, using a reverse genetic system of AIV. Then the recombinant AIV was entrapped by PEGylated transferrin-conjugated liposomes system (PTf-Ls) developed in our preliminary work. This PTf-Ls tumor vaccine can reproduce and be delivered specifically in tumor, which will induce considerable antitumor effect. The research of its antitumor effect and mechanism in mice bearing in situ induced breast carcinoma will provide practical basis for evaluating clinical value, which will contribute to explore a potential clinical application strategy for cancer biotherapy.

溶瘤病毒的抗肿瘤效力不足、靶向性等问题给其在临床上的广泛应用造成了一定困难。本课题以自主筛选到的兼具安全性和溶瘤效力的禽流感病毒（Avian Influenza virus, AIV）为载体，利用建立的AIV反向遗传操作系统，将具有刺激T细胞增殖、介导胸腺依赖的抗肿瘤反应、抗肿瘤血管生成和破坏肿瘤已形成血管作用的IP10(IFN inducible protein-10)基因插入到AIV基因组中，并重组肿瘤细胞特异的人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子，再将重组AIV包裹入经聚乙二醇修饰的转铁蛋白结合的纳米脂质体系统（PTf-Ls），实现重组AIV的靶向性复制和转导，将发挥可观的特异性抗肿瘤效应。在建立的原位诱发性乳腺癌小鼠体内研究重组AIV的抗肿瘤效果和作用机制，将为进一步研究其临床应用价值奠定基础，以期探索出一条具有潜在应用前景的肿瘤生物治疗策略。

溶瘤病毒的抗肿瘤效力不足、靶向性等问题给其在临床上的广泛应用造成了一定困难。本课题拟以自主筛选到的兼具安全性和溶瘤效力的禽流感病毒（Avian Influenza virus, AIV）为载体，利用建立的AIV反向遗传操作系统，将具有刺激T细胞增殖、介导胸腺依赖的抗肿瘤反应、抗肿瘤血管生成和破坏肿瘤已形成血管作用的IP10(IFN inducible protein-10)基因插入到 AIV基因组中，并重组肿瘤细胞特异的人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子，再将重组AIV包裹入经聚乙二醇修饰的转铁蛋白结合的纳米脂质体系统（PTf-Ls），实现重组AIV的靶向性复制和转导，将发挥可观的特异性抗肿瘤效应。本项目对具有抗肿瘤效力、拟作为载体的骨架病毒进行了纯化，并对前期研究中通过反向遗传操作技术以此骨架病毒基因构建的全禽源8质粒系统进行病毒拯救，成功获得具有感染性并在体内外有抗肿瘤效果的反向遗传操作病毒，表明本项目中的全禽源8质粒系统可作为用于肿瘤生物治疗的载体。目前本项目用此载体插入了IP10基因，下一步将继续摸索条件以期获得重组IP10基因的禽流感病毒，进行重组病毒的体内外抗肿瘤效果研究。在建立的原位诱发性乳腺癌小鼠体内研究重组AIV的抗肿瘤效果和作用机制，将为进一步研究其临床应用价值奠定基础。为提高建立原位诱发乳腺癌动物模型的效率，目前本项目已制备了三套过表达癌基因的病毒系统，以期进一步得到多套高效表达癌基因的乳腺癌动物模型，同时更能客观评价重组AIV 的抗肿瘤作用和机制，为进一步研究其临床应用效果提供更有参考价值的理论基础和实验依据。..