移植骨髓间充质干细胞再生修复唇腭裂组织的研究

先天性唇腭裂发病率占新生儿先天性畸形首位，作为涉及到骨、骨骼肌等多组织的复杂缺损，通过临床手术难以完全修复。胚胎腭间充质细胞增殖水平下降是裂隙发生的主要原因，骨髓间充质干细胞具有的多向分化能力为其再生修复提供可能。本课题组对维甲酸诱导腭裂小鼠腭组织的基因筛选中发现其异常表达基因，与骨髓间充质干细胞表达基因和微环境中液态因子具有高度重叠。因此，本研究采用维甲酸诱导腭裂小鼠作为基因和环境交互作用致畸的代表性模型，通过对腭裂间充质细胞与骨髓间充质干细胞体外共培养，以及显微注射骨髓间充质干细胞于腭裂组织间充质内进行的三维器官培养，观察骨髓间充质干细胞在腭裂组织微环境中的动态变化，其对腭裂间充质细胞增殖分化的调控以及对腭裂组织生长发育的直接影响，并筛选出相关基因和液态因子。本课题通过在腭裂模型中探索骨髓间充质干细胞对唇腭裂组织发育和生长的调控，为先天性唇腭裂的早期干细胞治疗提供实验依据和理论基础。

先天性唇腭裂发病率占新生儿先天性畸形首位，作为涉及到骨、骨骼肌等多组织的复杂缺损，通过临床手术难以完全修复。胚胎腭间充质细胞增殖水平下降是裂隙发生的主要原因，骨髓间充质干细胞具有的多向分化能力为其再生修复提供可能。本研究采用维甲酸诱导腭裂小鼠作为基因和环境交互作用致畸的代表性模型，以及应用Wnt5a基因敲除小鼠，进行腭裂的相关差异基因筛选和深入分析，本课题组首次在腭的发育期，应用Short-term BrdU retention study原理探讨出生前后体内腭部未分化间充质细胞的存在的可能性，并应用PCNA、Sox-2、Stro-1、P75、CD57等标记物辅助定位这些细胞。体外腭突细胞原代培养后流式细胞术检测神经嵴干细胞标记物Nestin，骨髓间充质干细胞标记物CD44，CD29以及血液干细胞标记物CD45表达率。应用海藻酸盐水凝胶建立了一种腭的长期器官培养体系，并探索了间充质干细胞在腭裂修复中的作用。