免疫球蛋白G在横纹肌肉瘤细胞中的表达对肿瘤生长的影响及病理学意义

近年来，研究者发现上皮性肿瘤细胞可以产生免疫球蛋白G（IgG），并且这种IgG具有促进肿瘤细胞增殖的功能。和上皮性肿瘤来源不同的软组织肿瘤是否功能性表达IgG值得研究。近期申请者发现间叶组织来源的横纹肌肉瘤细胞也表达IgG，并初步发现其表达与肿瘤的恶性转化相关，但IgG的表达对肿瘤生长的影响以及和病理指标的相关性还需进一步探索。本申请以前期实验为基础，拟进一步证实横纹肌肉瘤细胞IgG表达系自分泌，通过RNAi、抗体封闭技术研究IgG对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响；其次，运用免疫组化双重染色技术研究IgG和肿瘤增殖指标（PCNA、Ki67、Cyclin D1）之间的共定位关系，再次，采用组织芯片技术研究IgG的表达和横纹肌肉瘤组织学类型、病理分级之间的相关性；探讨IgG在横纹肌肉瘤细胞中的表达对肿瘤生长的影响及病理学意义，为横纹肌肉瘤的预后判断提供辅助指标。

传统观念认为免疫球蛋白 G（IgG）是B淋巴细胞的特征性产物。近年来，研究者发现上皮性肿瘤细胞可以产生IgG，并且这种IgG具有促进肿瘤细胞增殖的功能。和上皮性肿瘤来源不同的软组织肿瘤如横纹肌肉瘤是否功能性表达IgG是本项目的研究内容。通过本研究项目的完成，我们证实了软组织来源的横纹肌肉瘤细胞系和横纹肌肉瘤组织也存在IgG重链及轻链的表达， 这种表达系肿瘤自分泌。IgG的表达和肿瘤增殖指标（PCNA、Ki67、Cyclin D1）呈显著正相关的关系，并且和横纹肌肉瘤组织的病理分级呈正相关；其次，IgG抗体封闭试验证明了肿瘤源性的IgG可以促进肿瘤细胞的增殖、抑制肿瘤细胞的凋亡；最后，我们对肿瘤细胞产生IgG的分子机制进行了探讨，我们发现对免疫球蛋白重排起重要作用的重组活化基因（RAG1/RAG2）表达于肿瘤细胞，RAG的表达受转录因子E2A、FOXO1、FOXP1的调控，染色质免疫沉淀实验显示RAG的表达调控元件（ERAG）处于染色质开放的状态，转录因子E2A、FOXO1、FOXP1通过和ERAG直接结合来调控RAG的表达。我们不仅完成了本项目的研究目标，而且扩展了一部分研究内容，深入探讨了IgG在肿瘤细胞表达的分子机制和病理学意义，为进一步研究IgG在肿瘤细胞中的生物学功能提供了实验基础。