Homer/NFAT促进乳腺癌高表达跨膜型TNF-alpha的机制研究

骨架蛋白Homer可结合NFAT，使之失活，而NFAT又可对TNF-alpha的基因转录进行调节。我们的前期工作证实乳腺癌细胞高表达跨膜型TNF-alpha从而抵抗凋亡。在预实验中我们首次证实在不同的乳腺癌细胞株和乳腺癌患者的肿瘤组织切片中发现Homer2/3和tmTNF-alpha的表达呈负相关。那么在乳腺癌细胞中Homer与NFAT如何上调tmTNF-alpha，从而促进乳腺癌细胞抵抗凋亡？本项目拟通过体内外试验研究：⑴ NFAT与肿瘤细胞高表达tmTNF-alpha的关系；⑵Homer2/3对NFAT调节tmTNF-alpha基因转录的影响；⑶干扰Homer/NFAT对tmTNF-alpha的调控，在体内外观察对乳腺癌细胞生物学行为的影响。阐明乳腺癌高表达tmTNF-alpha的分子机制，为抑制tmTNF-alpha表达，提高乳腺癌细胞对凋亡刺激信号的敏感性提供新的思路和分子靶点。

作为一种多功能细胞因子，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与乳腺癌关系密切。国内外研究表明, 在实验性乳腺癌研究方面, TNF-α通过调节血管形成、活性氧、趋化因子、NF-κB等多种途径在乳腺癌的侵袭和转移中发挥重要作用; 临床应用方面,TNF-α在乳腺癌治疗中存在争议, 但有潜力应用于乳腺癌预后检测。Homer作为一种骨架蛋白能负向调节NFAT从而抑制T细胞的活化。我们的前期研究工作发现： tmTNF-α与受体结合后，既可引起受体后信号转导(正向信号)，也可传递信号至表达tmTNF-α的细胞 (反向信号)，引起相应生物学效应。tmTNF-α介导的正向信号能抑制NF-κB，诱导 Raji细胞凋亡；反向信号则引起NF-κB活化, 促进Raji细胞存活，提示肿瘤细胞自身高表达tmTNF-α就可抵抗凋亡刺激信号。但是，肿瘤细胞高表达tmTNF-α的分子机制是什么，迄今尚不清楚。在本课题中我们首次证实在不同的乳腺癌细胞株和乳腺癌患者的肿瘤组织切片中发现Homer2/3和tmTNF-alpha的表达呈负相关；NFAT能高效调节tmTNF-alpha基因的转录；Homer2/3对于NFAT有负向调节作用；干扰Homer/NFAT对于tmTNF-alpha对于肿瘤的生长、侵袭和转移都有很大的抑制作用。以上结果提示Homer/NFAT对于乳腺癌负调节功能而言是一个多步骤、多靶点的效应。以Homer骨架蛋白为代表探索其在乳腺癌耐药抵抗中发挥的作用，并阐明关键环节及其分子机制，对于寻找以Homer/NFAT为靶标来研发新药对于难治性的乳腺癌患者的治疗提供了新的理论依据。