幽门螺杆菌粘附素NLBH的克隆纯化及其免疫防治作用研究

克隆纯化了幽门螺杆菌的NL BH基因并制备重组蛋白：经扩增PCR调出NLBH的基因并克隆入表达载体pTr99中，体外表达并经硫酸铵沉淀、柱层析分离出29kd的重组蛋白rHpaA；体外评价RHpaA的生物学活性；光镜定量计数法进行粘附试验，用抗HpaA抗血清与Hp预孵育，经抗HprHpaA抗血清预孵育后，Hp粘附于胃上皮的菌数下降近2/3；体外评价HPaA对人T细胞表型的选择作用；将rHpaA与新鲜分离的人外周中血淋巴细胞共孵育后流式细胞仪测定T细胞表型，发现该蛋白可特异选择Th2细胞表型，具有粘膜佐剂的部分功能；活体验证rHpaA的免疫保护作用；在动物模型中评价了该蛋白与粘膜佐剂堆乱毒素合用时对Hp感染的免疫保护作用，发现对动物的部分保护率为90%以上。