锝标记c-erbB-1基因显像的实验研究

本研究将在已取得的锝标记反义肽核酸新方法基础上，以表皮生长因子受体（EGFR）原癌基因c-erbB-1 255-269碱基序列为靶序列，将5'-GTGTAAGGGAACTGT-3'反义肽核酸链5'端连上4个氨基酸Gly-(D)-Ala-Gly-Gly-，并引入一个氨基丁酸（Aba）作为隔离物，用配体交换法行99Tcm标记，即形成标记物99Tcm-N-Gly-(D)-Ala-Gly-Gly-Aba-GTGTAAGGGAACTGT,并用同样方法合成99Tcm标记的c-erbB-1正义肽核酸，对比分析两种标记物在人肺癌A-549及人胶质瘤U251荷瘤裸鼠显像及体内分布的差异,探讨99Tcm标记的c-erbB-1反义肽核酸对恶性肿瘤早期诊断的可行性，及其在以EGFR为靶点的抗肿瘤药物治疗疗效的预测及评价方面的潜在临床应用价值，为反义基因显像早日应用于临床提供重要理论依据，意义重大。

本研究以表皮生长因子受体（EGFR)原癌基因c-erbB-1 mRNA第503-519位碱基（genbank序列号：NM_201283.1）为靶序列，制备了核素锝（99Tcm）标记c-erbB-1反义肽核酸（PNA）分子探针，并测定了其标记率及放化纯，评价了其体内外稳定性，探讨了其在相应荷瘤裸鼠体内分布及显像的情况。并研究了促进反义分子探针进入靶细胞的方法，为进一步提高反义分子探针在肿瘤基因显像奠定了基础, 基本完成了项目研究计划。本研究表明：99Tcm标记c-erbB-1 mRNA 反义PNA标记率及放化纯均较高，体内外稳定性好，体内显像显示能特异性的聚集在c-erbB-1高表达的肿瘤组织中，可做为一种有潜力的核素分子探针用于EGFR c-erbB-1 mRNA阳性表达肿瘤的显像诊断，并可评价肿瘤EGFR表达治疗疗效。脂质体可以明显促进99Tcm-c-erbB-1 mRNA 反义PNA进入靶细胞，提高EGFR高表达肿瘤的显像效果，有助于肿瘤早期特异性诊断。