改造肿瘤微环境联合腺病毒介导的原位免疫治疗肝癌的研究

肿瘤内复杂微环境、肿瘤抗原不足和免疫提呈能力低下，是制约肝癌免疫疗效的瓶颈。本课题组在对肝细胞癌（HCC）微循环结构形态学和血管干预治疗的研究基础上，拟通过Bevacizumab阻断血管内皮生长因子改造微血管网络，明确血管正常化时间窗，降低HCC组织中调节性T细胞（Treg）的浸润，并在此时间窗内进行环磷酰胺（CTX）的节律治疗，进一步清除Treg，逆转肿瘤的免疫抑制微环境。而后原位转染腺病毒载体介导的自杀基因HSV-TK和免疫活性细胞因子基因GM-CSF，活化的HSV-TK杀伤癌细胞，原位释放肿瘤抗原，GM-CSF诱导树突状细胞（DC）趋化、促进DC对肿瘤抗原的提呈，诱导细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的产生，从而实现治疗和预防HCC复发的目的。通过对肿瘤微循环的分析、T淋巴细胞数量和活性变化、体内外CTL的杀瘤活性等指标的检测，明确其抗肿瘤的作用机制，为安全有效地治疗HCC提供科学依据。

本课题从微循环结构形态学层面深入地分析肝癌血管生成中特殊嵌合结构（vasculature mosaicism，VM）的空间构筑，尤其关注血管干预治疗中的管道变化和抑瘤效果。本课题已完成申请书的工作，经费按预算使用，取得了如下进展：通过肝癌荷瘤小鼠模型观察微血管网络，分析VM在空间构建及分布特点，在体内实验中利用Bevacizumab阻断血管内皮生长因子，同时联合不同的细胞毒性治疗方案进行微血管网络的改造和抗肿瘤治疗。结果显示，只有结合抗血管生成和细胞毒性治疗才对VM具有削减作用，节律化疗联合血管干预对肿瘤抑制和机体生存有明显优势，但是其并不能减少肺转移的发生。在此基础上，课题组降低HCC组织中调节性T细胞（Treg）的浸润，并在此时间窗内进行节律式细胞毒性治疗，进一步清除Treg，从而逆转肿瘤的免疫抑制微环境。