同源盒基因Cdx2对胃癌发生发展的影响

胃癌是我国最常见的消化道肿瘤，其年患病率和死亡率均为世界平均水平的2倍以上。本项目针对同源盒基因Cdx2参与调控胃癌发生发展的特点：①用酵母双杂交法筛查与Cdx2相互作用的蛋白，以免疫共沉淀和激光共聚焦验证这些蛋白；②构建各种类型的Cdx2载体转染胃癌细胞株，通过间接免疫荧光、激光共聚焦等观察其对筛查到的Cdx2相互作用蛋白以及肿瘤相关基因表达的影响，并观察其对胃癌细胞功能的影响，阐明Cdx2的体外功能机制；③建立人胃癌裸鼠移植瘤模型，结合临床胃癌样本，采用激光捕获显微切割技术，选择性分离胃癌细胞和转移瘤细胞，以Real-Time RT-PCR检测Cdx2相关基因的变化，以免疫电镜验证Cdx2及相关蛋白在胃癌细胞内的共存情况，以透射电镜观察胃癌细胞和转移瘤细胞的的结构变化，分析其与Cdx2相关分子的表达及患者病情的相关性，阐明Cdx2在胃癌发生发展中的作用机制。

本研究构建了Cdx2过表达载体和RNA 干扰的Cdx2沉默型载体，并转染胃癌细胞，结果发现：Cdx2过表达及沉默表达在体外或体内环境中均能使胃癌细胞生长减慢，侵袭和转移能力下降，凋亡率上升；Cdx2沉默可以逆转胃癌细胞的耐药性。另外，研究还发现，Cdx2通过调控凋亡、周期相关等不同的基因通路影响胃癌细胞生物学行为。本研究为进一步探索Cdx2在胃癌生物学行为中的作用以及其潜在的基因诊断及治疗能力打下了坚实的基础。