基于活性化合物发现与确认新型抗结核药物候选靶标

Drug-resistance tuberculosis becomes more and more serious. The anti-tuberculosis drugs lost their effects. The recovery rate of tuberculosis is greatly reducing. The development of novel anti-tuberculosis drugs has been become a global hot topic. So far, there is no new anti-tuberculosis drug used in clinical. The major reason is lack novel high effect and low toxic anti-tuberculosis drug targets. We had found that a new compound of benzamide have anti-tuberculosis activity. The first target of benzamide is not on Rv3582c, although the compound is able to influence the cell wall biosynthesis of mycobacterium tuberculosis. This project is based on the privious works. We will discovery the potential drug targets of benzamide. Using benzamide compounds as probes, molecular biology and tuberculosis protein chip, we look for potential drug targets which can interact with probes and find the role of the specific site. We will in-depth study the molecular mechanism of anti-tubeculosis. In finally, we will get candidate drug targets of anti-tuberculosis.

结核分枝杆菌耐药性的日趋严重，使原本疗效很好的抗结核药物失去了应有的效力，结核病的治愈率大大降低，研制新型抗结核药物已经成为全球的研究热点，但截至目前仍没有全新作用机制的抗结核药物问世，其最主要的原因就是缺乏高效低毒的抗结核药物新靶标。前期研究中发现了具有优良抗结核活性的苯甲酰胺母核化合物，通过进一步的研究发现了其抗结分枝核杆菌的首要作用靶标并不完全集中在Rv3582c上，并且能够影响结核分枝杆菌细胞壁的合成。本项目拟在以上工作基础上，寻找该类抗结核活性化合物的潜在药物靶标分子。研究采用化合物为探针逆找靶标的策略，以全新骨架结构的苯甲酰胺类抗结核化合物作为探针，应用分子生物学和结核蛋白质芯片等新技术，寻找具有相互作用的潜在药物靶标分子，发现其具体的作用位点，进一步深入研究其发挥抗结核作用的分子机制，最终获得抗结核新药物候选靶标。

结核分枝杆菌耐药性的日趋严重，使原本疗效很好的抗结核药物失去了应有的效力，结核病的治愈率大大降低，研制新型抗结核药物已经成为全球的研究热点，但截至目前仍没有全新作用机制的抗结核药物问世，其最主要的原因就是缺乏高效低毒的抗结核药物新靶标。本项目的主要研究内容包括：（1）合成N-(1,3,4-恶二唑-2-)-苯甲酰胺母核类化合物；（2）抗体抓捕和RNA-seq筛选活性化合物所影响的潜在靶标 （3）构建细菌靶标差异性表达的表型筛选模型（4）利用化合物探针，在分子、细菌和感染细胞等不同水平上进行靶标验证。取得的重要结果是合成了108个结构类似物，获得3个被F1374-0327化合物显著调控的蛋白质靶标分子分别为Chaperonin 2 OS、Rv3582c和Rv0674和7个被显著调控的基因分子靶标ctpA、ftn、dps、cmr，、gip、bioA和bioB。化合物F1374-0327具有优良的抗结核活性，并申请了化合物专利。发现的新靶标Rv0674由于功能活性都未知，，初步探讨了该分子作为分子诊断标志物的可行性。表型筛选模型为进一步发现新的药物先导化合物奠定了基础。发表中文核心论文3篇。申请1项国家发明专利和1项授权的实用新型专利。培养硕士研究生4名。上述研究成果的应用前景为开发抗结核病新药物、提供新靶标或诊断标志物分子。