从肾论治化疗相关性疲劳的神经酸代谢机制

Chemotherapy-related fatigue seriously affect the quality of life of cancer patients. According to our early work on cancer chemotherapy-related fatigue of WuZi YanZong Pill (WZYZ), we speculated that WZYZ might treat chemotherapy-related fatigue by corrective the nervonic acid metabolism. So, we treat chemotherapy-related fatigue from kidney. We try to explore the nervonic acid metabolism mechanism by research the effect of WZYZ to neurocyte and intestinal function. First, we analyses the content of fatty acids (nerve acid) in WZYZ by GC-MS. Then, we research the influence of intestinal absorption and in vivo synthesis of nervonic acid and the therapeutic effect to chemotherapy-related fatigue of WZYZ from the aspects of chemotherapy-related fatigue mice and cell models and genomics by PCR-DGGE, Western blot technology. Finally, clarify the effect on chemotherapy-related fatigue and the nervonic acid metabolism of WZYZ. And make clear the role of nervonic acid in the occurrence and treatment of chemotherapy-related fatigue, at the same time. This project would not only provide the experimental evidence for the clinical use of WZYZ in chemotherapy-related fatigue treatment and treat chemotherapy-related fatigue from kidney, but also provide a new idea for the treatment of chemotherapy-related fatigue by TCM.

化疗相关性疲劳严重影响肿瘤患者的生存质量。本项目根据前期补肾名方五子衍宗丸(WZYZ)对肿瘤化疗相关性疲劳作用的研究基础，推测WZYZ通过纠正体内神经酸代谢而治疗化疗相关性疲劳。因此，本课题拟从肾论治，研究WZYZ对神经细胞、肠道功能的作用，探讨化疗相关性疲劳的神经酸机制及WZYZ的作用。首先，运用气质联用技术明确WZYZ中脂肪酸(神经酸)的成分与含量。然后，运用PCR-DGGE、Western blot等技术从小鼠模型、细胞模型以及元基因组学方面研究WZYZ对神经酸的肠道吸收、体内合成及对化疗相关性疲劳的作用，阐明WZYZ对化疗相关性疲劳及机体神经酸代谢的影响，同时明确神经酸在化疗相关性疲劳的发生和治疗中的作用。本研究不但可为临床应用WZYZ治疗化疗相关性疲劳提供实验依据，还为中医从肾论治化疗相关性疲劳提供了实验依据，同时也为发挥中医药特色治疗化疗相关性疲劳提供新的思路。

化疗相关性疲劳严重影响肿瘤患者的生存质量，但目前缺乏疗效确切的治疗手段。本项目在前期对五子衍宗丸对化疗相关性疲劳作用的研究基础上，推测五子衍宗丸通过纠正体内神经酸代谢而治疗化疗相关性疲劳。因此，本课题拟从肾论治，分别研究了五子衍宗丸、神经酸对化疗相关性疲劳的缓解作用、对神经化疗损伤的保护作用以及对化疗性肠道损伤的保护作用。研究结果示：①药物研究：经GC-MS分析，五子衍宗丸中共测出19种脂肪酸，其中9种为饱和脂肪酸、10种不饱和脂肪酸，但神经酸的绝对百分含量为0.001%。②体内实验：五子衍宗丸、神经酸可显著提高化疗小鼠的游泳时间、机械痛阈值。五子衍宗丸对小鼠因使用化疗药物引起的大鼠背根神经节、肠道黏膜、体重减轻、腹泻有一定保护作用。五子衍宗丸可提高化疗小鼠肠道黏膜细胞Bcl-2表达水平、降低Caspase-3表达水平，提高Bcl-2/Bax比值、降低NF-κB/p65表达水平、减少化疗小鼠肠道黏膜细胞的凋亡。五子衍宗丸、神经酸均可提高化疗小鼠肝脏的FAS 蛋白表达水平。五子衍宗丸组小鼠的肠道微生物的多样性明显多于化疗组小鼠，五子衍宗丸组小鼠的肠道菌群OTU数量高于紫杉醇组和神经酸组。五子衍宗丸组小鼠肠道中拟杆菌门含量均比紫杉醇组高，比正常组低。五子衍宗丸组小鼠肠道中厚壁菌门含量均比紫杉醇组低，比正常组高。③体外实验：含五子衍宗丸大鼠血清组与含神经酸大鼠血清组对维持PC12细胞、IEC-6细胞形态有一定的保护作用。含五子衍宗丸的大鼠血清与含神经酸的大鼠血清可在一定程度上减少紫杉醇通过p38途径促进PC12细胞、IEC-6细胞凋亡的作用，并降低紫杉醇组A-FABP表达水平。综上所述，五子衍宗丸、神经酸对化疗相关性疲劳有缓解作用，其作用机制可能与改善化疗小鼠肠黏膜功能、减少化疗对细胞的毒性作用、减轻细胞凋亡，调节肠道菌群、调节脂肪酸代谢等有关。本研究不但可为临床应用五子衍宗丸治疗化疗相关性疲劳提供实验依据，还为中医从肾论治化疗相关性疲劳提供了实验依据，同时也为发挥中医药特色治疗化疗相关性疲劳提供新的思路。