脑缺血预处理中Ngb的表达变化及其脑保护作用机制的研究

脑缺血预处理作用的核心是脑组织在短暂的缺血缺氧后启动了一系列各种因子的内源性表达调控机制。新发现的神经系统特异性携氧球蛋白- - 脑红蛋白（Ngb)能够促进氧在脑内的利用，在神经系统氧摄取、运输和利用中起重要的作用。体外和动物实验证明NGB与脑缺血缺氧性损伤密切相关。由此我们提出，"Ngb在脑缺血预处理中可能具有重要的神经保护作用"。本课题拟系统观察脑缺血预处理中NGB在脑内的表达变化，检测在脑缺血预适应过程中，脑脊液和血液中Ngb的动态变化规律，阐明Ngb在脑缺血预处理中所起的作用。并探讨Ngb作为脑缺血性损伤后反应神经功能指标的意义。本研究还将向脑内转染NGB腺病毒载体，研究脑红蛋白的过量表达，能否增强脑缺血预处理的神经保护作用。通过此研究，有望阐明脑红蛋白在脑缺血预处理过程中的作用机制，可能为脑缺血性损伤的诊疗提供一个新的指标，也为缺血性脑损伤的防治提供一种新的思路。

脑红蛋白（NGB）是一种主要位于中枢和外周神经元内、能够可逆性结合氧的球蛋白，其具有重要的储氧和氧利用功能。本课题主要对脑缺血预适应（BIP）后脑红蛋白的动态变化、神经保护作用及其机制进行研究。实验结果表明，SD大鼠BIP后脑再缺血损伤后，BIP干预组和直接缺血损伤组均出现NGB阳性细胞数表达上调，BIP干预组在缺血损伤后16h阳性细胞数即达高峰，较单纯缺血再灌注损伤组24h阳性细胞数峰值提前，提示BIP干预可以使Ngb表达上调提前，且BIP干预组较对照组NGB的表达增多，说明NGB可能参与了BIP对缺血性脑损伤的保护作用。同时，采用双抗夹心ELISA方法检测脑缺血损伤后血清中NGB的含量，发现血清中NGB水平在脑损伤后上调。最后，采用基因转染技术，将重组NGB腺病毒载体立体定向注入脑内，使Ngb高表达，然后施以大鼠局灶性脑损伤。结果显示损伤灶体积较对照组明显减小，伤侧海马CA1区细胞丢失减少，凋亡细胞数明显减少。表明Ngb在BIP后的在缺血脑保护过程中可能起重要作用。