蜂王浆脂质组学分析

蜂王浆脂质是蜂王浆特有的脂质组，为了从蜂王浆脂质中鉴定未知脂质分子和确定已知脂质分子的质量浓度，和以此为线索表征蜂王浆脂质的脂质组特征，我们对意大利蜜蜂生产的蜂王浆进行脂质组学分析（或脂质组学鉴定）。首先通过分级分离方法从蜂王浆中提取脂质组，然后通过分级分离方法和（或）柱层析方法从脂质组中富集不同类别脂质分子，最后通过高分辨率的基质辅助激光解析离子化-二级串联飞行时间质谱方法对不同类别脂质分子进行定性分析，并且通过高灵敏度的超高效液相色谱方法结合电喷雾离子化-二级串联四极杆质谱方法的联合应用对不同类别脂质分子进行定量分析。在本研究中，从脂质组中富集不同类别脂质分子，在脂质组水平采用高分辨率的质谱方法和高灵敏度的液-质联用方法对蜂王浆脂质进行定性和定量分析，是目前文献尚未报道的。这种从蜂王浆中制备不同类别脂质分子，并对其进行定性和定量分析，构成了本文的蜂王浆脂质组学分析。

蜂王浆脂质是蜂王浆的主要营养素之一，也是评价蜂王浆品质的主要指标之一。然而，由于蜂王浆脂质的组成成分具有广泛的不均一性，相关文献没有报道蜂王浆中究竟有多少脂质分子，以及它们相互之间存在的结构关系。本研究在脂质组水平揭示蜂王浆脂质的组成成分和展示蜂王浆脂质的组成特征。通过分级分离方法和柱层析方法对蜂王浆初级脂质提取物进行的样品分析前处理，我们从蜂王浆中分别得到了富含脂肪酰类脂质分子和富含固醇脂类脂质分子的不同的次级脂质提取物；通过基质辅助激光解析离子化-二级串联飞行时间质谱方法的离子全扫描模式和选择性离子扫描模式对次级脂质提取物进行的质谱检测，以及在线质量检索引擎提交质谱数据于数据库以检索候选分子的质谱鉴定，我们从蜂王浆脂质中鉴定了77种脂肪酸分子和19种固醇分子。这些脂肪酸分子在蜂王浆脂质中呈现的组成特征是：（1），所有脂肪酸分属于6个不同亚类的脂肪酰类脂质分子，其中归属于羟基脂肪酸亚类的数量最多；（2），几乎所有脂肪酸羧基的存在形式为游离型；（3），绝大多数脂肪酸烷基主链的分子量大小为中链长度，而且主要是那些主链碳原子数为8、10和12的脂肪酸；（4），相当数量脂肪酸烷基链的选择性共价修饰方式是羟化，一定数量脂肪酸烷基链的选择性共价修饰方式是氧化和去饱和。这些固醇分子在蜂王浆脂质中呈现的组成特征是，所有固醇分属于3个不同亚类的固醇脂类脂质分子。这提示蜂王浆脂质组学分析能够在脂质组水平揭示蜂王浆脂质的组成成分和展示蜂王浆脂质的组成特征。