2,5二酮基-D-葡萄糖酸还原酶基因克隆与表达研究

基本信息
批准号:39770021
项目类别:面上项目
资助金额:11.00
负责人:尹光琳
学科分类:
依托单位:上海中科伍佰豪生物工程有限公司
批准年份:1997
结题年份:2000
起止时间:1998-01-01 - 2000-12-31
项目状态: 已结题
项目参与者:陈策实,宋祺,李越,何建明
关键词:
5DKG还原酶2克隆表达
结项摘要

通过多年的研究已完成项目预期目标。从棒状杆菌SCB3058中克隆得到两个2,5-二酮基-D-葡萄糖酸(2,-5-DKG)还原酶Ⅰ和Ⅱ基因,经大肠杆菌表达得到高活力的酶蛋白。在此基础上实现了在欧文氏菌SCB125中的表达和优化,在5升自控罐中实现了从葡萄糖一步发酵产生维生素C前体2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)。研究过程中发现在欧文氏菌SCB125中存在两个2-酮基醛糖还原酶(2-KR),严重影响目的产物2-KLG的产生和积累。PCR扩增得到两个长度约1Kb的2-KR基因(tkrA和tkrB),开展了欧文氏菌SCB125中敲除tkrA和tkrB的工作,已获得一株敲除了tkrA基因的SCB125菌株。

项目摘要

项目成果
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数据更新时间:2023-05-31

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