高亲合力RANK突变体防治雌孕激素替代疗法所致乳腺癌的研究

绝经后妇女的雌孕激素替代疗法被广泛用于更年期综合征的治疗中，然而其促发乳腺癌的风险性已成为该疗法的极大弊端。去年11月份Nature期刊上发表的论文首次揭示了细胞因子RANKL在黄体酮类激素促发乳腺癌过程中的关键作用，该研究使得RANKL-RANK信号通路阻断物成为雌孕激素替代疗法所致乳腺癌的极具希望的防治药物。在本研究中，我们在已成功解析获得RANKL-RANK三维结构信息的基础上，拟开展系统的基因突变与蛋白分子相互结合试验，设计和制备可用于阻断RANKL-RANK信号通路的高亲合力RANK蛋白突变体，并利用细胞实验和乳腺癌动物模型对其防治雌孕激素替代疗法所致乳腺癌的生物学效能进行检测。该蛋白突变体有望开发为防治雌孕激素替代疗法促发乳腺癌的前体药物。

已有研究表明细胞因子RANKL在雌孕激素促发乳腺癌过程中起关键作用，因此RANKL-RANK信号通路阻断物的开发和利用在防治雌孕激素替代疗法所致乳腺癌方面具有重要的价值和意义。在本研究中，我们在前期成功解析获得RANKL-RANK 三维结构信息的基础上，设计并制备了一系列可增强与RANKL之间亲和力的RANK突变体蛋白，再利用biacore分析技术筛选获得一种与RANKL高亲和力结合的RANK突变体。随后我们利用改造后的哺乳动物细胞表达系统制备了突变体蛋白RANKmut-Fc，并利用细胞实验其对RANKL-RANK信号通路的阻断活性进行了验证，之后再利用小鼠动物模型对其雌孕激素（MNU+MPA）所致乳腺癌的防治效果进行了检测。结果表明，该RANK突变体可以有效地阻断RANKL-RANK信号通路，其阻断活性强于野生型RANK，并且可以有效防治雌孕激素（MNU+MPA）所促发的乳腺癌。本项目获得的增强型RANK突变体将成为防治雌孕激素替代疗法所致乳腺癌的新型候选药物, 具有一定的临床应用价值和社会经济效益。