基于PI3K/Akt通路探讨阿司匹林在多发性骨髓瘤中个体化治疗与化疗增敏的机制研究

The PI3K/Akt signaling pathway, activated by PIK3CA-encoded P110, occupied a pivotal role in the carcinogenesis and chemoresistance of multiple myeloma (MM). Recently we found that Aspirin (ASA) induced apoptosis of myeloma cells via upregulating Bax and inhibiting Bcl-2 and VEGF, which are the very downstream molecules of PI3K/Akt cascade, indicating that PI3K/Akt pathway may be the key target of ASA in MM. The study aims to further explore: ①the effect of ASA on myeloma cell lines without PIK3CA gene by siRNA and the expression of PIK3CA gene in anti-MM of ASA; ②the anticancer activity of ASA on primary myeloma cells in vitro & in vivo and the role of ASA's individualized therapy in MM; ③the influence of ASA on adhesion of myeloma cells and bortezomib (BTZ) resistance by stroma; ④the interaction of ASA and BTZ on MM cells and the chemosensitive mechanisms of ASA to BTZ via examination of Akt and Survivin. The results will provide the rationale for personalized treatment and chemosensitivity of ASA in MM.

PIK3CA基因通过编码P110激活PI3K/Akt通路，而该通路异常激活与多发性骨髓瘤（MM）发生、发展与耐药密切相关。我们最近发现，阿司匹林（ASA）经上调Bax、下调Bcl-2与VEGF诱导MM细胞凋亡，而三者恰是PI3K/Akt通路的下游分子。据此推测：PI3K/Akt通路可能是ASA抗MM作用的关键靶点。本项目拟继续：①利用siRNA干扰MM细胞PIK3CA基因，观察MM细胞系对ASA的敏感性和PIK3CA基因在ASA抗MM中的意义；②经体外与临床试验观察ASA的抗MM作用，探索PIK3CA在ASA个体化治疗MM中的价值；③观察ASA对骨髓基质细胞（BMSCs）粘附及其介导的硼替佐米（BTZ）耐药的影响；④分析ASA与BTZ在MM细胞中的相互作用，经检测Akt与Survivin蛋白，探索ASA对BTZ抗MM的增敏机制。本研究为ASA个体化治疗MM及作为BTZ的增敏剂提供依据。

多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma，MM）发病率位居血液肿瘤第2位，尽管沙利度胺与硼替佐米等代表性药物显著改善了MM预后，然而几乎所有MM患者难免出现复发与耐药，至今仍不可治愈。近年来研究发现：ASA对人结肠癌（CRC）、肝癌、胰腺癌、肺腺癌等肿瘤具有抗癌作用。回顾性临床研究显示：与仅接受DVd-T方案化疗的MM病例相比，低剂量ASA联合DVd-T方案的1年生存率显著提高。据此推测：ASA有可能在延长MM患者生存期起重要作用。.研究方法：1.以人MM细胞株与荷MM小鼠移植瘤为研究对象，分别体外检测不同浓度ASA对人MM细胞株的细胞增殖、周期、凋亡的影响，在荷瘤小鼠体内观察ASA对移植瘤生长与荷瘤小鼠生存期的影响；通过基因转染PIK3CA方法，检测ASA处理MM细胞株前后PIK3CA mRNA与蛋白表达变化。2.通过ASA联合硼替佐米（BTZ）处理人MM细胞系，观察二者联合对MM细胞增殖与凋亡的影响，探讨ASA对BTZ的化疗增敏机制。 3.通过ASA联合LEN处理MM细胞系，观察两者联合对 MM 细胞增殖、凋亡及细胞周期阻滞的影响。4. 临床研究：观察92例初治MM，比较单纯化疗和化疗联合应用ASA两组的疗效。. 实验研究结果提示： 1. ASA在体内外对MM具有抗肿瘤效，PIK3CA基因是ASA发挥抗MM作用的分子靶标， 2. ASA具有增强BTZ的抗骨髓瘤细胞增殖的作用。3、ASA具有协同LEN抑制骨髓瘤细胞增殖与抗血管生成作用。. 临床研究结果提示：1、 ASA可提高MM的疗效。2、 ASA可以降低MM的深静脉血栓发生率，且并未增加其他不良反应发生风险。.我们首先证明了阿司匹林具有抗骨髓瘤作用，并能与目前应用骨髓瘤治疗药物有协同作用，该研究成果为ASA临床应用治疗MM提供理论依据。