福氏志贺菌sRNA识别及功能研究

目前的实验与生物信息学研究表明，细菌基因组中存在着许多小的非编码RNA(sRNA)，它们通过多种方式调控靶基因的表达，从而在细菌与环境的相互作用中发挥重要作用，因此，开展福氏志贺菌sRNA识别及功能研究可以发现与福氏志贺菌致病相关的调控sRNA,有助于深入了解福氏志贺菌的致病机理，同时细菌的毒力是细菌致病的关键，通过与志贺菌毒力相关mRNA与sRNA的相互作用研究，找出具有重要调控作用的sRNA，探讨作为潜在的药物靶标的可能性，从而避免志贺菌新的耐药性的产生。因此，开展此项研究对充分了解细菌的毒力调控机制和抗细菌感染研究有着重要的意义。

small RNA（sRNA）是一类广泛存在于细菌中的非编码RNA，在细菌的基因表达调控中发挥着重要作用，然而福氏志贺菌中sRNA的毒力和致病等相关功能却较少报道。在本次研究中，首先运用生物信息学方法预测福氏志贺菌sRNA，然后通过RT-PCR，northern blot, RACE等一系列实验方法验证sRNA的存在，经实验验证在福氏志贺菌2a 301中新发现4条sRNA。肺侵袭和豚鼠角膜等毒力实验表明其中两条sRNA（sRNA1 和sRNA54）与毒力相关，sRNA1 与福氏志贺菌的毒力升高有关，sRNA54与福氏志贺菌的毒力减弱有关。.　　 Hfq是细菌小RNA的分子伴侣蛋白，在细菌的毒力和耐受环境压力发挥着重要作用。它的主要作用方式是通过形成六聚体与RNA作用来影响RNA的稳定性或者通过影响RNA与mRNA结合来调节靶基因的表达。本课题中我们研究Hfq在福氏志贺菌中的毒力和环境压力的作用。结果表明Hfq在抵抗酸性、碱性及渗透压等环境压力条件下发挥着重要作用，同时，HeLa细胞侵袭实验及小鼠肺侵袭实验均表明Hfq与福氏志贺菌的毒力有关。该研究首次表明Hfq在环境压力中发挥的作用，以及通过体内和体外毒力实验均证实了Hfq与毒力的相关性。