IL-33/ST2信号转导通路对脂多糖诱导肺微血管内皮细胞旁通透性变化的影响及机制研究

肺微血管内皮细胞粘附连接受损导致细胞旁通透性增加是脓毒症急性肺损伤发生的重要原因。LPS/TLR4信号转导被证明介导脓毒性内皮细胞粘附连接的破坏。IL-33受体ST2与LPS受体TLR4同属Toll/IL-1受体超家族，拥有相似的信号转导途径，募集下游相同的衔接蛋白(MyD88)。研究发现，ST2对TLR4具有负调节作用。我们预实验表明，外源性给予IL-33对LPS性内皮损伤具有保护作用，但机制不清楚。故本项目拟在前期工作基础上以IL-33/ST2信号通路为切入点，采用免疫荧光染色、蛋白印迹、免疫共沉淀及基因沉默等方法，从细胞水平观察IL-33对LPS刺激后肺微血管内皮细胞旁通透性的影响，建立LPS小鼠肺损伤模型，从整体水平观察IL-33对内毒素性小鼠的肺保护作用，探讨IL-33/ST2信号通路对LPS导致的肺微血管内皮细胞旁通透性影响的可能分子机制，为早期防治脓毒症及其肺损伤提供新思路。

脂多糖（LPS）引起的急性肺损伤目前尚无特效疗法，肺微血管内皮细胞粘附连接受损导致细胞旁通透性增加是其重要的病理因素。LPS促发多种炎症因子释放引发病理过程，同时机体还存在内源性抗炎机制，表现为LPS耐受现象：机体给予LPS预处理后，再次给予LPS对其反应性变弱。IL-1R相关蛋白ST2是IL-33的配体，被认为与LPS耐受有关。本研究旨在探讨IL-33/ST2是否通过参与LPS耐受进而对LPS相关疾病具有保护作用。研究结果表明，IL-33预处理后，LPS急性肺损伤小鼠7天生存率明显降低，肺毛细血管通透性增加，肺组织MPO水平增多，支气管灌洗液中致炎因子TNF-α and IL-6浓度增加，而抑炎因子TGF-β1 and IL-10浓度降低，肺组织p-ERK, p-JNK and p-p38表达均增加，并增强VE-cadherin磷酸化，破坏血管完整性而加重ALI。提示IL-33通过激活TLR4下游的MAPK，增强LPS炎症反应，并破坏内皮细胞间的粘附连接使通透性增加。可见，外源性IL-33可能对LPS模型小鼠的肺组织具有增强炎症作用，而IL-33/ST潜在的治疗作用尚有争议。