髓磷脂碱性蛋白在急性一氧化碳中毒脑损伤中的作用研究

急性一氧化碳（CO）中毒是发生率和死亡率最高的中毒。30%以上即使经过治疗也会发生迟发性脑病（DNS）。主要表现为神经精神异常，诊断、治疗不及时，将为社会和家庭带来很大负担。DNS发病机制目前尚未完全阐明。研究表明DNS与免疫因素相关，且部分患者有明显脱髓鞘改变。髓磷脂碱性蛋白（MBP）是髓鞘主要蛋白，易受脂质过氧化损伤。我们前期工作表明，大鼠CO中毒后脑内出现与免疫反应相关的细胞因子，且MBP表达发生改变。因此，我们推测在急性CO中毒到DNS发生之间的"假愈期"内，MBP作为抗原诱导了免疫损伤。本研究拟采用急性CO中毒大鼠模型，以免疫损伤为切入点，利用多种技术手段，从整体到细胞水平全面研究MBP在急性CO中毒脑损伤中的作用，并通过高压氧（HBO）治疗，分析HBO对急性CO中毒后免疫损伤和MBP的影响。本项目将进一步揭示DNS的发生机制和HBO的治疗原理，也为DNS预防与治疗提供新的思路。

急性一氧化碳（CO）中毒是发生率和死亡率最高的中毒。30%以上即使经过治疗也会发生迟发性脑病（DNS）。主要表现为神经精神异常，诊断、治疗不及时，将为社会和家庭带来很大负担。DNS发病机制目前尚未完全阐明。我们通过急性静息性CO吸入制备可靠的动物模型；通过行为学实验，证明急性CO中毒脑损伤可造成学习记忆能力下降；通过多种实验方法证明， 急性CO中毒脑组织MBP表达减少，并存在脱髓鞘损伤，且二者存在明显的时间和空间上的一致性；急性CO中毒脑组织可见非特异性免疫效应细胞（巨噬细胞）和特异性免疫效应细胞（CD4、CD8阳性细胞）浸润，以及免疫反应相关的细胞因子表达增加，且MBP表达高峰早于免疫效应细胞浸润的高峰时间，但在空间上具有一致性；高压氧治疗可显著减轻MBP改变、髓鞘损伤和脑组织免疫炎症反应。在急性CO中毒大鼠脑内可见变性MBP，而MBP损伤可能与氧化应激相关，急性CO中毒可使脑组织抗氧化酶活性下降，Nrf2通路改变，HBO治疗可提高脑组织抗氧化能力，使Nrf2与keap1解离，进入胞核与ARE序列结合，调控抗氧化酶。HBO治疗急性CO中毒大鼠脑组织RNA序列分析发现，急性CO中毒，HBO治疗以及对照组大鼠脑组织有25个差异基因，通过RT-PCR和real time PCR 的进一步筛选，4个基因（Pomc, GH-1, Pr1 and Fshβ）变化最显著，这4个基因均为下丘脑-垂体系统相关。Pathway聚集分析发现，参与急性CO中毒脑损伤的通路主要与多巴胺代谢和NO合成相关。