硫化氢对动脉粥样硬化斑块脂核形成的影响及机制研究

硫化氢(hydrogen sulfide, H2S)是近年新发现的具有心血管保护作用的内源性气体信号分子。本项目在我们前期工作观察到H2S抑制巨噬细胞内脂质蓄积的基础上，拟于在体的动脉粥样硬化(atherosclerosis，As)模型上，观察内源性H2S生成和生成酶表达的变化；以斑块脂质含量、脂核面积及脂核面积与斑块总面积比值为指标，观察H2S处理或内源性H2S生成抑制对斑块脂核形成的调节作用，评估斑块稳定性。并在整体和细胞水平，以LXRα活性为靶点，以胆汁和粪便中固醇含量、巨噬细胞内胆固醇流出率、胆固醇转运相关基因表达为指标，观察H2S对巨噬细胞胆固醇逆向转运的影响，以论证H2S促进斑块巨噬细胞内胆固醇逆转运是减少巨噬细胞内脂质蓄积、抑制斑块脂核形成、从而增加As斑块稳定性的重要机制之一的假说，以期探寻As斑块破裂和急性心脑血管事件防治的新策略。

脂核是动脉粥样硬化(atherosclerosis, As)易损斑块的主要病理学特征之一，可致斑块破裂和急性冠脉综合征的发生。本研究通过体内体外实验观察了硫化氢(hydrogen sulfide, H2S)调控动脉粥样硬化斑块脂核形成的作用及其机制。结果发现：1，巨噬细胞存在H2S/CSE系统。免疫组织化学法染色人颈动脉和apoE-/-小鼠主动脉根部切片，发现As病变内有CSE(cystathionine gamma-lyase,胱硫醚-γ-裂解酶)表达，且CSE主要表达于富含CD68+巨噬细胞的病变区域。细胞实验发现人单核源性巨噬细胞有丰富的CSE表达，并内源性产生H2S，此过程受L-半胱氨酸和CSE抑制剂炔丙基甘氨酸(DL-propargyglycine, PPG)调控。氧化低密度脂蛋白(oxLDL)可下调巨噬细胞CSE表达及H2S产生。2，在高脂饲喂的apoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型上证实，通过硫氢化钠（NaHS）上调体内H2S水平后可较对照组减小apoE-/-小鼠As斑块病变面积和脂核面积，抑制脂质蓄积。我们还发现，与对照组比较，NaHS组As病变内仅积累了少量的泡沫细胞、泡沫细胞面积较小，巨噬细胞含量和ABCA1表达也减少。而PPG组较对照组增大As斑块病变面积和脂核面积，增加泡沫细胞和巨噬细胞含量，上调ABCA1表达。3，在小鼠腹膜巨噬细胞模型上， NaHS减少巨噬细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量，促进巨噬细胞内胆固醇外流和ABCA1、LXRα蛋白表达。本项目的研究结果有助于进一步阐明硫化氢抗动脉粥样硬化的作用机制及其在斑块稳定性中的作用。