LncRNA MAFTRR调控ANXA1促进非酒精性脂肪性肝炎发生发展的作用及机制研究

Long non-coding RNAs (LncRNA) plays a crucial role in the regulation of lipid metabolism; however, the role of LncRNA in non-alcoholic steatohepatitis (NASH) is not well known. Our preliminary study showed that MAFTRR, a highly conserved lncRNA, was upregulated in animal models of NAFLD. In contrast, downregulation of MAFTRR increased ANXA1 expression, and decreased the expressions of M1 macrophage related markers. Besides, bioinformatics analysis showed that MAFTRR could bind with PRC2 complex and the promoter of ANXA1 gene. Therefore, we hypothesis that MAFTRR upregulated in NAFLD modulates macrophage activation and polarization by inhibiting ANXA1 expression, contributing to the onset of NASH. Furthermore, MAFTRR could bind and recruit PRC2 complex to the promoter of ANXA1 gene, and suppress ANXA1 expression by histone H3 lysine 27 trimethylation. Therefore, this project is to investigate roles and molecular mechanisms of MAFTRR in animal and cell models of NASH. Our project may provide new theoretical and experimental basis for blocking the occurrence and progression of NASH.

长链非编码RNA（LncRNA）是脂质代谢调控的重要因子，但其在非酒精性脂肪性肝炎中的作用尚不清楚。我们前期研究发现，MAFTRR是一种高度保守的LncRNA，在非酒精性脂肪性肝病动物模型中的表达水平显著升高，沉默MAFTRR可显著上调ANXA1的表达，下调M1型巨噬细胞标志分子的表达；结合生物信息学分析发现，MAFTRR可能同时与EZH2/SUZ12和ANXA1启动子结合。据此我们提出假说：MAFTRR在NAFLD中高表达，而高表达的MAFTRR通过抑制ANXA1的表达，调控巨噬细胞的活化和极化，促进NASH发生，其机制可能涉及MAFTRR作为支架募集PRC2复合物至ANXA1的启动子区域，介导组蛋白H3第27号赖氨酸三甲基化，抑制ANXA1的表达。因此，本课题以MAFTRR为切入点，探讨MAFTRR在NASH中的作用及作用机制，为NASH发病机制的研究及治疗提供新的理论和实验依据。

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是指除外饮酒和其他明确的肝损害因素所致的，以肝内脂质过度沉积为主要特征的临床病理综合征，现已成为发达国家和我国富裕地区慢性肝病的首要病因，其致病机制尚不清楚。长链非编码RNA（LncRNA）是一类重要的基因表达调控分子，参与多种生物学过程，因此本课题从LncRNA的角度探寻NAFLD的发生发展的分子机制。申请人前期提出LncRNA MAFTRR可能通过调控ANXA1促进NASH的进展，本项目通过慢病毒介导的过表达及沉默，证实MAFTRR可促进THP-1巨噬细胞向M1型极化，并抑制M2型巨噬细胞极化。进一步研究发现MAFTRR可抑制ANXA1的表达，而过表达ANXA1可逆转MAFTRR对M1型巨噬细胞极化的影响。提示MAFTRR可通过抑制ANXA1促进巨噬细胞向M1型极化参与NASH进展。在完成预期研究目标的基础上，课题组采用高通量基因芯片技术对NAFLD模型小鼠肝组织LncRNA/mRNA表达谱进行了研究，与正常对照小鼠相比，发现了780个差异表达的LncRNA，578种差异表达的mRNA，这些LncRNA/mRNA可能参与了NAFLD的发生发展，为后续相关研究打下基础。最后，课题组对AK142643这一特定的LncRNA分子在NAFLD中的作用及作用机制进行了研究，利用腺病毒介导的过表达和沉默，我们在细胞和动物实验中证实AK142643可促进肝细胞内脂质沉积，并在分子水平阐明了AK142643通过结合IGF2BP2促进CD36表达的分子机制。这些研究成果可为NAFLD发病机制研究提供实验依据，为NAFLD的诊断和治疗提供潜在靶点。