小麦白粉病菌对三唑类杀菌剂抗性分子机制的研究

比较对三唑酮抗性和敏感的小麦白粉病菌的14α-脱甲基酶基因(CYP51)序列发现：敏感菌株的第136位的酪氨酸在高抗菌株中突变成苯丙氨酸(Y136F点突变) 。低抗菌株的该基因氨基酸序列与敏感菌株没有差异，但在低抗菌株中该基因的启动子区插入一个1.2-kb的转座子，转座子前、后端的重复序列可能与CYP51基因在低抗菌株中过量表达有关。因此，本项目拟建立农杆菌介导的白粉病菌基因转化系统，将含Y136F点突变和含转座子的CYP51全基因分别转入敏感菌株中，以确定Y136F点突变和启动子区的转座子是否是白粉病菌对三唑酮产生抗性的直接抗药机制。另外，将低抗菌株的CYP51基因启动子区内的转座子进行一系列缺失或突变后，克隆到绿色荧光蛋白基因(GFP)的上游，然后转入敏感菌株中，测定GFP在转化体中表达水平，分析启动子区的转座子对基因表达的影响。