仙台病毒Tianjin株通过LncRNA-ISR22/MAVS/ROS通路调控骨肉瘤自噬的机制研究

In the process of infecting the tumor cells, the oncolytic virus can induce a large amount of LncRNAs in the body， which may directly affect many physiological functions of the cells, but its role and mechanism in tumor cell autophagy have not been reported yet.The latest evidence suggests that oncolytic viruses can regulate autophagy in tumor cells via the MAVS/ROS pathway, and we have previously found that SeV-TJ can up-regulate the expression of ISR22 after infection with osteosarcoma cells, and ISR22 can participate in the regulation of the expression of MAVS and downstream signals , while MAVS is closely related to ROS production and autophagy. Therefore, we propose a scientific hypothesis that "SeV-TJ can regulate the occurrence of autophagy in osteosarcoma cells through the ISR12/MAVS/ROS pathway, and the occurrence of autophagy may be regulated by ROS and MAVS."Based on the pre-experiment, this study will gradually demonstrate the above hypothesis through a rigorous and rational scientific research design and a combination of experiments, providing an important theoretical basis for the treatment of osteosarcoma with autophagy and provide more treatment options for the prevention and treatment of clinical osteosarcoma.

溶瘤病毒感染肿瘤细胞的过程中能诱导机体产生大量的LncRNAs，后者的改变可能会直接影响细胞诸多的生理功能，但其在自噬中所发挥的作用及机制目前尚无报道，属于自噬研究的空白领域。最新的证据表明，溶瘤病毒可以通过MAVS/ROS通路在肿瘤细胞中调控自噬的发生，同时我们前期研究也发现SeV-TJ感染骨肉瘤细胞后可以上调LncRNA-ISR22的表达，且ISR22可以参与调控MAVS及其下游信号通路，同时MAVS与ROS产生和自噬发生关系密切。因此，我们提出科学假说“SeV-TJ可以通过ISR12/MAVS/ROS通路调控骨肉瘤细胞中自噬的发生”。本研究将在预实验的基础上，通过严密而合理的科研设计，并采用多种实验相结合的方法，逐步论证上述假设，为以自噬为核心的骨肉瘤治疗提供重要的理论依据，同时为临床骨肉瘤的防治提供新的思路。

骨肉瘤同时以恶性程度高、生长迅速、早期转移、预后不佳为特点，对患者、家庭乃至社会造成巨大的痛苦，已成为世界肿瘤领域里亟待解决的问题。既往研究发现病毒在肿瘤治疗方面具有极大的潜能，其在感染肿瘤细胞的过程中能诱导机体产生大量的长链非编码RNA（LncRNA）从而影响细胞诸多的生理功能。因此，本项目结合前期基础探讨仙台病毒Tianjin株（SeV-TJ）感染骨肉瘤细胞后产生的ISR22对细胞自噬所发挥的作用及机制。我们的研究发现如下：（1）在骨肉瘤细胞中ISR22产生分别与SeV-TJ或IFN-β的孵育呈浓度-时间依赖性；（2）SeV-TJ感染骨肉瘤细胞后可以通过生成IFN-β促进ISR22表达，同时IFN-β可以通过ISR22调节MAVS及其下游信号分子表达；（3）ISR22可以通过与MAVS相互作用促进IFN-β在骨肉瘤细胞中生成；（4）ISR22可以通过和MAVS相互作用抑制 PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导骨肉瘤细胞自噬的发生；（5）ISR22与MAVS相互作用可以诱导骨肉瘤细胞中ROS的产生，同时后者可以通过抑制PI3K/AKT/mTOR 通路磷酸化导致自噬的发生。因此，我们的研究认为SeV-TJ可以通过ISR22与MAVS/TRAF3/IRF3/IFN-β通路相互作用，最终经 ISR22/MAVS/ROS轴抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导骨肉瘤细胞自噬的发生。本项目课题的完成将为以自噬为核心的骨肉瘤治疗提供重要的理论依据，同时也为临床骨肉瘤的防治提供更多的治疗选择，让研究的成果更具有临床实用性。