白芍硫磺熏蒸前后对相关经典方剂疗效、毒性及化学物质基础影响的研究

基于白芍硫磺熏蒸后主要化学成分在结构和含量上发生了显著变化，并导致其药效降低及毒性升高，同时白芍又是一味中医临床经典方剂中的常用中药，因此硫磺熏蒸过的白芍可能会影响到相关方剂的临床疗效。截止目前，有关使用硫磺熏蒸中药材及饮片所引起的中药复方汤剂临床疗效、毒性及化学物质基础变化的研究几乎仍为空白。本课题选择桂枝汤、四物汤、升麻葛根汤这三种临床常用的汤剂为研究对象，运用现代色谱分析技术，结合微透析及药理和毒理实验方法，研究白芍硫磺熏蒸前后对三种经典方剂药效和毒性的影响，探讨白芍硫磺熏蒸前后三种经典汤剂煎出物化学结构与煎出物中主要有效成分含量的变化规律，同时考察白芍硫磺熏蒸前后三种经典汤剂中主要有效成分体内药物动力学过程的差异，最终阐明与揭示白芍硫磺熏蒸前后对三种经典汤剂临床疗效、安全性及化学物质基础的影响，为控制硫磺熏蒸在中药材及饮片加工过程中的非法应用，确保中医临床用药安全有效提供理论依据。

本课题组前期研究发现，硫熏会引起白芍主要药效成分发生化学转化。鉴于白芍是一味中医临床经典方剂中的常用中药，本课题系统考察了白芍硫熏前后的桂枝汤、升麻葛根汤和四物汤的化学成分、药代动力学、药效和毒性方面的变化。通过HPLC-DAD及UHPLC-Q-TOF/MS方法发现，含硫熏白芍的三种经典方剂中多种有效成分的含量均有所降低并均伴有新的成分生成，同时通过Q-TOF/MS方法对多种新产生的化学成分做了结构鉴定。通过对白芍硫熏前后三种经典方剂的药代动力学研究发现，含硫熏白芍的三种经典方剂中的芍药苷的Cmax、Tmax、AUC0-t和AUC0-∞均有极显著性的降低（P<0.01）。此外，含硫熏白芍的升麻葛根汤中的甘草苷和阿魏酸的Cmax和Tmax也均有不同程度的降低；与含未硫熏白芍的桂枝汤相比，含硫熏和自熏白芍的桂枝汤中的甘草苷的AUC0-t和AUC0-∞均有极显著性的升高（P<0.01），AUC0-t分别升高了83.67%和90.05%，AUC0-∞分别升高了89.26%和91.61%，且含硫熏和自熏白芍的桂枝汤的血浆清除率（CL）均有极显著性的降低（P<0.01），分别降低了48.69%和49.21%。含硫熏白芍的三种经典方剂中有效成分药代动力学性质的显著性变化与白芍硫熏后引起方剂中多种有效成分含量的变化以及含硫熏白芍的方剂的整体环境变化（如pH）有关。药效学考察发现，含硫熏白芍的桂枝汤在镇痛和抗炎方面的药效均低于含未硫熏白芍的桂枝汤；含硫熏白芍的升麻葛根汤在解热、镇痛和抗炎方面的药效均低于含未硫熏白芍的升麻葛根汤；而含硫熏白芍的四物汤对血虚模型和血瘀模型的补血作用和活血作用的效果均要弱于含未硫熏白芍的四物汤。急性毒性的结果显示含硫熏白芍的升麻葛根汤和四物汤的毒性强于含未硫熏白芍的升麻葛根汤和四物汤。长期毒性的血液生化指标及病理切片显示，长期服用含硫熏白芍的相关经典方剂对肝肾均可造成一定的毒性作用，且毒性作用具有不可逆性。以上研究表明，含硫熏饮片的方剂在化学成分、药代动力学、药效和毒性方面都可能产生一定的改变，因此本课题组采用电子舌技术建立了饮片硫熏前后方剂的快速鉴别方法，并成功区分了白芍硫熏前后的三种经典方剂。