黄芪多糖对缺血再灌注损伤大鼠心肌线粒体mPTP开放及其调控因素的影响

通过结扎大鼠左冠状动脉前降支复制大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，利用缺血再灌注即刻给药的方法，模拟缺血后处理的效应机制，以药物预处理为对照，采用免疫组化、分子生物学、细胞生物学、流式细胞等方法和技术，研究黄芪多糖后处理对缺血再灌注损伤线粒体结构、活性氧簇、线粒体跨膜电位、线粒体通透性转换孔道（mPTP）开放和线粒体钙离子浓度等的作用。探讨黄芪多糖对抗MRI的疗效和作用环节及其是否具有"缺血后处理"的效应。推测改善气虚是实现"缺血后处理"效应的主要方法之一。

心肌缺血再灌注损伤是困扰临床医生的一大难题。动物实验证实缺血预处理、缺血后处理可以减轻再灌注损伤。但是缺血不能预知，而在临床中反复的再灌注/缺血循环在心肌缺血后又很难保证进行，缺血预处理和后处理均不能实现。“药物后处理”是缺血后处理研究的深入，即通过药物模拟内源性机制来发挥缺血后处理的保护作用，减轻再灌注损伤。.心肌缺血再灌注损伤时引起线粒体功能紊乱，而线粒体mPTP开放目前被认为是介导缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的重要机制之一。在前期工作中得出，黄芪多糖从多方面减少缺血再灌注心脏微血管内皮细胞损伤。本研究模拟缺血后处理的效应机制，从线粒体角度，探讨黄芪多糖是否具有“药物后处理”的效应。.结果显示：与对照组相比，预处理组、后处理组、腺苷组三组血清CK、TNI显著减低（P<0.05），梗死区质量、梗死区面积均显著减少（P<0.01）。与腺苷E组相比，预处理组组、后处理组组血清CK、TNI显著减低（P<0.05），梗死区质量、梗死区面积减少（P<0.05）。.缺血再灌注组线粒体损伤严重，表现出明显的空泡变性，线粒体肿胀，线粒体脊膜破裂。预处理组、后处理组和腺苷组均可明显减轻线粒体损伤程度。预处理组线粒体损伤程度较后处理组轻一些，心肌线粒体数量明显增多, 肿胀较轻, 外膜较完整, 嵴排列较紧密。.预处理组线粒体膜电位较对照组的膜电位有所减低（P<0.01），而腺苷组和后处理组膜电位减低没有统计学意义。.预处理组、后处理组以及腺苷组的mPTP活性均较对照组增高（P<0.05）。预处理组相比腺苷组的mPTP活性增高（P<0.01）。.预处理组和后处理组与对照组相比线粒体的钙离子浓度均有所减低（P<0.01）。预处理组的线粒体钙离子浓度要低于后处理组（P<0.01）。.预处理组、后处理组以及腺苷组均较对照组ROS降低（P<0.01）。预处理组较后处理组和腺苷组ROS也有所降低（P<0.05）。.从以上结果可以看出除了线粒体膜电位后处理组没有显现减低以外，无论是预处理还是后处理在线粒体结构、细胞氧簇、线粒体跨膜电位、线粒体通透性转换孔道（mPTP）开放和线粒体钙离子浓度各方面均有减轻缺血再灌注损伤作用。证明黄芪多糖具有“药物后处理”效应，可以为开发“药物后处理”药物提供细胞线粒体方面的证据。