支气管上皮细胞RSV持续感染诱导的气道高反应性机制

本项目拟建立RSV持续感染诱发的气道高反应性动物模型,采用直接病毒培养、测定血清中RSV抗体、测定支气管上皮细胞（BECs）RNA和mRNA的方法确定RSV的感染状态，并实时、动态、连续监测气道阻力；联合酶机械法刷洗BECs,RFDD-PCR技术筛选正常乳鼠与RSV持续感染诱导的气道高反应性乳鼠差异表达基因，制备基因芯片检测差异基因在RSV持续感染期间的时序改变，筛选诱发气道高反应的关键基因，RT-PCR、western blot检测其基因和蛋白的表达；抗体芯片筛选正常乳鼠与气道高反应乳鼠差异表达神经肽，免疫组化和原位杂交分析气道神经纤维、神经内分泌细胞，神经肽及受体的时空变化。从BECs与神经网络的角度阐明气道高反应发生的分子机制，预期将阐明RSV持续感染诱发气道高反应性机制，具有重要的学术意义。