麦粒灸配合细胞免疫疗法治疗中晚期胃癌的免疫协同作用研究- - 对淋巴细胞的枢纽调节和血液转录组的影响

Rain-moxibustion is one of ancient and effective acupuncture techniques,which is on the brink of the lost. It is effective for chronic refractoriness disease,but the mechanism has not yet been fully elucidated.In the preliminary studies, we realized: The Moxibustion auxiliary CIK cells for cancer can significantly improve efficacy. Peripheral blood lymphocytes like a "floating brain", which can recept and remember information. For moderate inflammation and painperception caused by the Moxibustion, lymphocyte perception and regulation to stimulate overall immune benign regulation. Ultimately it assisted single cell immunity play a greater role, just like the improvement of the soil for seed growth.The study focus on the change of the function of lymphocyte and the transctriptome change of peripheral blood. Try to analysis the celluar and molecular mechanism of the immune synergy of the grain-moxibustion with the CIK cell therapy to advanced gastric. The lymphocyte function, gene expression and pathway changes are dynamicly monitored. The association relationship of those data with prognosis and clinical effectness are also analysised.

麦粒灸是我国古老、卓效却濒于失传的针灸技术，系用小艾炷在穴位上直接烧灼来治疗疾病，对慢性难治性疾病有很好效果，但机制尚未完全阐明。课题组前期发现：麦粒灸在配合CIK细胞过继性免疫治疗肿瘤的过程中，能够显著提高疗效。由于外周血中的淋巴细胞似一"漂浮的大脑"，具有感受和记忆功能，是神经-内分泌-免疫系统相互联系的枢纽，我们推测麦粒灸是人为造成适度的炎症和疼痛，通过淋巴细胞的感知和调节作用激发整体免疫的良性调节，从而辅助单一的细胞免疫发挥更大的作用。恰似土壤的改善有利于种子的生长。本项目在临床疗效的基础上，动态监测多种淋巴细胞功能指标以及外周血液转录组的相关表达，通过整合不同层面的数据，阐明麦粒灸对"以淋巴细胞为核心，外周血免疫因子为表现，血液转录组变化为基础"的整体免疫功能的影响，以期揭示麦粒灸与生物治疗之间产生免疫协调的部分细胞与分子机制。

本研究以麦粒灸辅助CIK细胞过继性免疫疗法对胃癌患者的免疫协同作用，与单用麦粒灸、单用CIK细胞免疫疗法的对照，在临床观察疗效的基础上，动态监测淋巴细胞功能的相关指标：外周血淋巴细胞总数、NK细胞、T细胞亚群（CD3、CD4、CD8等）、细胞因子以及肿瘤标记物，并研究外周血血液转录组（mRNA以及microRNA）的相关表达。. 研究发现：麦粒灸疗法对患者的生活质量有显著的改善，表现在生活质量评分总体健康状况/生活质量领域以及躯体功能、情绪功能、认知功能、疲倦、疼痛、气促、失眠、食欲丧失方面；麦粒灸疗法还能够降低非化疗后癌症患者的中性粒-淋巴细胞比率，也就是淋巴细胞数量增加，中性粒细胞减少，提高血小板的数量，提高免疫：麦粒灸疗法还可以通过增加淋巴细胞及其亚群的数量、激活NK细胞和激发细胞因子的活性（IL-1,IL-2)来调节机体的免疫功能。在外周血血液RNA-seq的检测中发现，麦粒灸可以降低基因的差异表达，麦粒灸可以促进基因的上调功能富集分析，富集主要集中在生物调控、膜以及蛋白结合上，下调功能富集分析，富集主要集中在代谢过程、膜以及蛋白结合上。差异表达基因KEGG注释：单用麦粒灸组，基因上调主要参与了核糖体、肌动蛋白骨架、血小板激活等通路，下调主要参与了核糖体、氧化磷酸化、抗原加工等的通路。空白对照组上调主要参与了氧化磷酸化、核糖体、噬菌体等通路，下调主要参与了破骨细胞分化、Th17分化以及内吞作用等代谢通路。麦粒灸辅助CIK细胞免疫组上调主要参与了核糖体、噬菌体等通路，下调主要参与了核糖体、抗原过程、Th细胞分化等通路。单用CIK细胞免疫疗法组上调主要参与了核糖体、氧化磷酸化、破骨细胞分化等通路，下调主要参与了核糖体、抗原过程、Th细胞分化等通路。. 麦粒灸可以作为一种适度的伤害性刺激可以持续激发肿瘤患者的整体免疫调节。