脂联素对microRNA-133的调控在心肌肥厚中的作用

近年来的研究证实miR-133能直接调控心肌肥厚发生、发展，并可调节心肌细胞的肥大和凋亡及心肌成纤维细胞的增殖。脂联素亦具有抑制心肌细胞肥大、抗心肌纤维化影响心肌重构，并抑制心肌凋亡的作用。但脂联素是否具有调控miR-133抗心肌肥厚的作用尚不清楚。本研究综合国内外的研究现状，在深入分析脂联素调控miR-133抗心肌肥厚的基础上，提出了APN-AMPK/ERK/Smads途径在脂联素调控miR-133在心肌肥厚中可能起到重要作用的假设。本研究拟从细胞及整体水平上，利用分子生物学、细胞生物学等技术，研究心肌肥厚过程中脂联素及miR-133的变化，同时应用外源性脂联素干预，观察脂联素对心肌肥厚过程中miR-133的调节及对心肌肥厚的影响及其可能的信号转导通路网络，揭示脂联素通过调控miR-133干预心肌肥厚的作用规律，为心肌肥厚的治疗提供新思路，为脂联素治疗心肌肥厚提供新的理论依据和治疗策略。

病理性心肌肥厚不仅是高血压的并发症，而且是引起猝死、心律失常、心肌梗塞等的危险因素之一。因此，搞清心肌肥厚的调控机制是十分必要的。脂联素（APN）和miR-133a都是重要的心肌肥厚的调控因子。然而，APN是否具有调控miR-133a抗心肌肥厚的作用尚不清楚。本研究通过动物模型和体外培养原代新生大鼠心肌细胞相结合，通过细胞生物学、分子生物学等多种技术手段，观察：（1）Ang II是否能够诱发心肌肥厚及其对于APN和miR-133a的影响；（2）APN是否抑制Ang II诱发的心肌肥厚及其对于miR-133a的作用；（3）APN对于miR-133a的调控机制及其对于miR-133a靶蛋白的影响。我们的研究结果发现：（1）Ang II 诱导的心肌肥厚大鼠模型中，血清脂联素的含量降低，同时miR-133a的表达受到抑制；（2）慢病毒介导的APN的表达载体转染大鼠，能够抑制Ang II诱导的心肌肥厚并上调miR-133a的表达；（3）为了进一步研究APN对于miR-133a的调控机制，我们提取了新生大鼠心肌细胞进行了进一步的实验。结果发现与体内实验结果相一致，加入外源性重组APN能够抑制Ang II处理引起的心肌细胞肥厚，且能够上调miR-133a的表达。（4）通过一系列不同药物处理、AMPK抑制剂干预或基因敲减、ERK抑制剂预处理，同时结合分子生物学等检测技术，我们发现APN通过激活AMPK，抑制ERK激活来实现对于miR-133a的正调控。此外，我们的研究还证实脂联素还能够抑制miR-133a的靶蛋白CTGF的表达，并且发现APN的这些作用是通过其受体AdipoR1来实现的。本研究的成果对于明确APN调控心肌肥厚的机理提供了新的证据，为临床治疗心肌肥厚相关疾病提供了新思路。