大黄附子汤温里散寒作用的物质基础研究

大黄附子汤始载于《金匮要略》，由大黄、附子、细辛三味药物组成，是中医温里散寒、泻结行滞的经典方剂，临床上主要用于治疗肾功能衰竭及尿毒症，阑尾炎、肠梗阻、慢性结肠炎、急性胰腺炎等症。该方临床应用广泛，但截止目前，其药效物质基础方面的研究仍为空白，故有必要对其进行系统研究。本课题运用中药复方药物动力学、中药血清药理学、中药血清药物化学等现代研究理论并采用微透析、HPLC、UPLC-TOF-MS、GC、GC-MS等现代取样、分离分析技术手段，分别从组成该处方药味中的有效成分和化学成分群，结合整体动物实验（寒积便秘动物模型）和血清药理学实验的药效学结果，进行大黄附子汤的药效物质基础研究，力求揭示其温里散寒作用的物质基础和作用机理。

大黄附子汤始载于张仲景《金匮要略》，由大黄、附子、细辛三味中药组成, 本课题研究目的在于阐明大黄附子汤发挥温里散寒作用的物质基础。首先，课题组对方中所用饮片进行了质量评价，从全国不同医疗机构和中药市场收集到不同批次的饮片样品，参照《中国药典》2010年版I部进行检测，确保质量合格的饮片入选，为后续研究工作提供质量保证。. 利用UHPLC-ESI-Q-TOF-MS技术建立可以对给药后大鼠血清样品中各化学成分进行鉴定的分析方法，获得血清中各个移行成分的含量和结构信息；同时在中医理论指导下，结合医生临床经验，采取急性胰腺炎作为临床寒积里实证的表征，在细胞分子水平上，通过给与雨蛙素造成胰腺细胞急性炎症模型，考察不同时间点含药血清样品对于病态胰腺细胞的保护作用，最后通过统计学相关分析手段对数据进行处理。研究结果表明，塔拉萨敏、大黄素、大黄酚、大黄酸、次乌头原碱等均为大黄附子汤发挥温里散寒作用的物质基础，其中大黄酸、大黄酚、大黄素等是通过代谢产物的形式发挥药效的。 . 利用UHPLC-ESI-MS/MS技术建立可以对给药后大鼠血浆中大黄酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚以及苯甲酰新乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰乌头碱和次乌头碱进行含量测定的体内分析方法，获得上述成分在实验动物大鼠体内的药物浓度-时间曲线；同时在整体动物水平上，考察给药后不同时间点生物样品的淀粉酶含量，获得效应-时间曲线。最后通过PK-PD模型相关统计学分析计算，进一步发现大黄酚与芦荟大黄素为复方发挥药效的物质基础。. 综合以上两种实验设计得出的结果，谱效相关方法具有灵敏度高、普遍性强的特点，可以给出可能存在的活性代谢产物信息；PK-PD模型则要基于大量实验数据的采集，具有集中分析，突出重点的优势。二者的最终结果相互认证，互为补充。