“甘草附子汤”吸收转运机制及药效物质基础研究

本项目以传统经典方剂"甘草附子汤"为研究对象，利用多级串联质谱及其联用技术，对该方中各单味药、药对及全方中不同类型的化学组分进行分析，系统研究配伍前后化学成分的变化规律；在此基础上，利用已构建的药物吸收转运体外模型（Caco-2细胞模型），全面考察方剂中各单味药、药对和全方中化学组分在吸收转运过程中的变化规律，以及吸收转运过程中不同类化学组分之间、同类组分中各化合物之间的相互作用，揭示方剂中组分间协同或拮抗作用本质，阐明方剂中化学组分吸收转运机制；通过整体动物实验，确定方剂中的有效组分和主要有效成分，将吸收转运体外实验研究所获得的化学信息与动物实验所获得的药效信息相关联，阐明中药方剂多成分多途径作用机制，明确该方治疗风湿痹症的药效物质基础 ，为中药方剂药效物质基础研究提供新思路、新方法。

传统经典方剂”甘草附子汤”由黑顺片、炙甘草、桂枝、和白术4味药材组成，在临床上主要用于治疗风湿及类风湿性关节炎。深入研究“甘草附子汤”吸收转运机制及药效物质基础，开展了本项研究。. 本项目以传统经典方剂"甘草附子汤"为研究对象，利用多级串联质谱及其联用技术，对该方中各单味药、药对及全方中不同类型的化学组分进行分析，系统研究配伍前后化学成分的变化规律；在此基础上，利用已构建的药物吸收转运体外模型（Caco-2细胞模型），全面考察方剂中各单味药、药对和全方中化学组分在吸收转运过程中的变化规律，以及吸收转运过程中不同类化学组分之间、同类组分中各化合物之间的相互作用，揭示方剂中组分间协同或拮抗作用本质；通过整体动物实验，确定方剂中的有效组分和主要有效成分。主要研究结果如下：. UPLC-Q-TOF分析“甘草附子汤”复方水煎液中共分析了72种化合物，甘草附子汤中主要化学成分为生物碱、黄酮和皂苷类化合物，还有少量的有机酸及内酯类化合物。“甘草附子汤”中黄酮和皂苷类组分主要来源于甘草，生物碱类组分主要来源于黑顺片，有机酸和内酯类物质主要来源于桂枝和白术。“甘草附子汤”各药材间存在协同或拮抗作用，可促进黄酮类成分皂苷类成分含量的增加，双酯型生物碱显著降低，单酯型生物碱增加较多；. 复方共煎液与单煎合并液比较，单酯型生物碱苯甲酰次乌头碱和苯甲酰新乌头碱的吸收增加，双脂型生物碱乌头碱、新乌头碱以及苯甲酰次乌头碱的吸收降低；三种黄酮类成分甘草素-葡萄糖芹糖苷、甘草苷、甘草素的吸收均有所提高；甘草皂苷吸收降低，甘草酸吸收增加。.复方中皂苷和生物碱类组分均能提高黄酮类组分的生物利用度；对于皂苷类组分，黄酮类组分降低其生物利用度，生物碱类组分提高其生物利用度；对于生物碱类组分，黄酮类组分提高其生物利用度，皂苷类组分降低其生物利用度。. 复方中，各味药材、各组分之间相互作用，多途径发挥免疫、抗炎作用和镇痛作用，其中黄酮、皂苷和生物碱类物质均为有效成分，且黄酮主要发挥抗炎作用，皂苷和生物碱均发挥镇痛作用。本项研究将成分分析和吸收转运体外实验研究所获得的信息与动物实验所获得的药效信息相关联，阐明中药方剂多成分多途径作用机制，明确该方治疗风湿痹症的药效物质基础 ，为中药方剂药效物质基础研究提供新思路、新方法。