化学发光检测法具有诸多的优点,但选择性较差,涉及复杂样品分析时常存在干扰。用固定的适配体探针可有效地去除基体干扰,但其固定过程繁琐,故需对适配体探针的重复利用进行研究以避免适配体的重复固定步骤。本项目提出了将发光二极管诱导化学发光(LED-CL)技术与适配体传感器相结合,利用光敏剂标记的适配体在LED灯的辐射下能强烈催化氧化鲁米诺产生化学发光却又不损失这一特性,通过筛选高效的光敏剂对适配体进行标记以及设计不同形式的适配体探针,发展可重复使用且高灵敏度的LED诱导化学发光适配体传感器,从而有助于拓展化学发光适配体传感器应用范围,并减少分析时间及试剂用量的消耗,实现更为绿色的分析。
发光二极管诱导化学发光(LED-CL)技术具有背景低、灵敏度高、无需加入氧化剂等优点,且是一种无酶的光催化发光技术。本项目将LED-CL技术与适配体传感器结合,建立了新型的LED-CL适配体传感器。项目以核黄素为分析物代表,通过对识别条件、洗脱条件、再生条件的影响研究,建立了可重复使用、无流路分支的断续流动注射LED-CL适配体传感体系。该体系对核黄素检出限低达8 pg mL-1, 重复使用100次后分析性能无明显降低,也可直接用于其它有LED-CL信号响应的物质如黄素腺嘌呤单核苷酸、黄素腺嘌呤二核苷酸、蒽醌类化合物等的检测。通过对一系列的常用于标记蛋白质、核酸的染料分子如异硫氰荧光素(FITC)、Cy3、Cy5及CdTe量子点等的LED-CL效应进行研究,发现FITC具有很强的光催化氧化性能。用FITC标记血小板衍生生长因子(PDGF-BB)适配体,建立了夹心型LED-CL适配体传感体系,对PDGF-BB检出限可达50 pM比大多数无信号放大技术方法的检出限低。在此研究基础上,该体系可拓展至其它目标蛋白如凝血酶、溶菌酶、IgE等的检测。该项目研发的LED诱导化学发光适配传感体器具有灵敏度高、无涉及生物酶的使用、染料小分子标记时对适配体识别影响小、有望实现重复使用等优点,可为疾病诊断、食品安全等领域提供有用的分析测试新技术。
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数据更新时间:2023-05-31
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