基于无标记适体技术化学发光方法检测食品污染物OTA和ATP

Now Chinese people are paying more and more attention to food contamination problem in livelihood issues. How to detect quickly and easily food contaminants become to be the urgently mission for scientific research workers. In this study，magnetic microspheres as a separate and fixed carriers, using chemiluminescence analysis, high resolution using a nucleic acid aptamers for ochratoxin A (ochratoxin A, OTA) combination of rapid development of label-free detection of OTA in food-based gold nanoparticles hydroxylamine enlarge chemiluminescence method for highly sensitive detection of OTA in food; and designed to distinguish the two-component OTA and adenosine triphosphate based on different microcarriers (adenosine triphosphate, ATP) unmarked chemiluminescent sensitivity and rapid simultaneous detection in food sensing applications; binding aptamer technology, homemade magnetic microspheres as efficient enrichment carboxyl carrier OTA or ATP molecules to achieve environmental and food samples in highly sensitive chemiluminescent detection. The use of equipment is easy to operate chemiluminescence analysis of the new method is expected for our food OTA analysis and rapid and sensitive detection of ATP and other studies to play a role.

食品污染问题在如今中国的民生问题中越来越被重视，故其如何快速便捷检测也是科研人员应亟待解决的使命。本课题以磁性微球作为分离和固定载体，采用化学发光分析方法，利用核酸适体对赭曲霉毒素A的高特异性结合，拟开展无标记快速检测食品中赭曲霉毒素A和基于金纳米颗粒羟胺放大高灵敏化学发光方法检测；并且设计了基于不同微载体分辨双组分赭曲霉毒素A和三磷酸腺苷的无标记化学发光高灵敏快速同时检测及在食品中的检测应用；结合适配体技术，自制磁性羧基微球作为赭曲霉毒素A或三磷酸腺苷分子的高效富集载体,实现环境及食品中样品快速高灵敏化学发光检测。该利用仪器设备简单、操作简便的化学发光分析新方法有望为我国食品中污染物赭曲霉毒素A和三磷酸腺苷等快速灵敏分析检测研究发挥一定的作用。

随着人们对健康重视程度增加，健康食品的需求尤为关注，故发展灵敏检测食品污染物新方法显示出良好的应用前景。.本课题以磁性微球作为分离和固定载体，基于无标记适体技术，采用化学发光免疫分析方法，放大检测食品污染物赭曲霉毒素A（OTA）、三磷酸腺苷（ATP）等检测物，并且结合纳米粒子技术发展高灵敏新检测技术。发展无标记快速检测OTA和基于金纳米颗粒羟胺放大高灵敏检测食品中常见污染物OTA的化学发光方法；自制二氧化硅纳米粒子结合适体传感器在食品中氯霉素（CAP）检测研究；且设计了基于不同微载体分辨多组分进行ATP、CAP无标记化学发光高灵敏快速同时检测；结合适配体技术，自制磁性羧基微球和自制二氧化硅纳米粒子作为OTA、ATP分子的高效富集载体,实现食品中样品高灵敏化学发光检测，低成本且更灵敏方法为食品检测提供新的思路。.利用磁性分离技术，结合核酸外切酶降解ATP适体技术开发一种化学发光法来检测食品中ATP；利用铁氰根离子和镍离子双重催化鲁米诺化学发光体系，巧妙设计了组氨酸联接铁氰化镍纳米粒子与核酸适配体的化学发光适体传感器，建立了高灵敏度的氧化损伤标记物8-羟基鸟苷分析方法且实现了癌症患者尿样测定；结合酶切技术、磁分离技术及DNA链取代技术，检测DNA甲基转移酶（Dam MTase）活性及成功用于检测Hela（宫颈癌）细胞裂解物中的Dam MTase，为临床癌症前期诊断提供了有利分析数据。.利用芬顿（Fenton）试剂氧化磁性微球上富含G碱基DNA产生氧化损伤物8-羟基脱氧鸟苷且实现化学发光即时检测，且发现水环境污染物中重金属离子中的Cr6+对DNA造成的氧化损伤较大，而抗氧化剂白藜芦醇和原花青素能有效地降低氧化损伤程度，实现体外化学发光即时氧化损伤程度检测；结合酶切技术，基于适体生物传感器的化学发光双信号比率提高检测核酸酶EcoR V灵敏度且可以实现人血清中的样品检测，该方法有望用于食品、环境、临床诊断、药物分析等领域。