含PAS 结构域蛋白在信号传递中的功能分析

最新研究表明，PAS结构域(PAS domain)主要存在于那些直接或间接参与信号传导的蛋白质中。信号传递蛋白通过PAS结构域，可以感应光、氧、氧化还原电位和细胞总体能量的变化。我室利用酵母双杂合系统，以NifA蛋白为诱饵，从巴西固氮螺菌中的基因文库中，筛选到两个与NifA蛋白有直接相互作用的、含有PAS结构域的蛋白质基因。对其中之一的部分研究结果表明它可能对环境中的氧信号进行传递。在此基础上，本研究主要开展以下三个方面的研究工作：首先构建缺失PAS结构域的突变株，并将nifA-lacZ和nifH-lacZ导入突变株中，然后在空气和微好氧条件下分别测定β-半乳糖苷酶活性，从而了解PAS结构域对氧信号的感应情况。第二研究PAS蛋白的自我磷酸化作用和对NifA蛋白的磷酸化作用，从而了解PAS蛋白是否通过磷酸化作用进行信号传递。第三研究PAS蛋白是否含有辅基FAD，并以FAD对氧信号进行传递。