运用生物荧光GFP标记的CD4+CD25+调节性T细胞诊断早期胃癌的研究

胃癌是严重威胁我国人民健康的重要疾病之一，治疗胃癌的关键是早期诊断。目前早期胃癌诊断方法的共同缺点是对早期胃癌原发灶的敏感性和特异性不是很高，且重复性差。最近的研究表明：几乎所有的人类恶性肿瘤像胃癌、肺癌、肝癌、肠癌、胆管癌、乳腺癌、子宫癌、血癌、胰腺癌、睾丸癌、直肠癌、皮肤黑色素瘤、皮肤淋巴瘤等患者外周血和肿瘤部位CD4+CD25+调节性T细胞（Regulatory T Cells）数量异常增加，且生物学特性异常。鉴于此，本研究拟在胃癌的小鼠模型中运用绿色荧光（Green Fluorescent Protein，GFP）调节性T细胞研究癌症的不同阶段调节性T细胞的生物学特性，同时结合真体内动物活体成像系统（IVIS Imaging System）研究调节性T细胞在胃癌病灶部位富集程度的活体影像来探索诊断早期癌症的新方法。

趋化因子受体CCR6与结肠癌关系的研究是本实验室的重点研究方向之一，实验室前期工作发现在小鼠结肠癌肿瘤组织中浸润着的调节性T细胞且表达趋化因子受体CCR6。本研究在前期研究工作的基础上，进一步探讨了CCR6在调节性T细胞的功能和作用机制。首先，通过体内和体外实验证实小鼠结肠癌细胞CMT-93和肿瘤相关巨噬细胞都分泌CCR6的唯一配体CCL20。另外，在小鼠皮下移植瘤的肿瘤微环境中注射重组的CCL20会显著促进肿瘤的发展并且招募大量的调节性T细胞。最后，在CD11b-DTR全身选择性敲除巨噬细胞的小鼠上建立皮下移植瘤会导致肿瘤微环境中趋化因子CCL20的分泌减少，并且阻止调节性T细胞在肿瘤微环境中的迁移。另外，我们发现CCR6在结肠癌的细胞株和结肠癌病人肿瘤标本中都高表达且与病人生存期有着强烈相关性。体内体外实验都证实CCR6增强了结肠癌细胞的恶性和转移程度。最后，在小鼠肿瘤微环境中阻断肿瘤细胞CCR6导致结肠癌的发生发展的显著抑制。