蒙药黑冰片的药效物质基础及其对胃寒性“协日”病的作用机制研究

As the commonly used medicinal materials in Mongolian and Tibetan medicine prescriptions, Har gaber is prepared by calcining stuffy wild boar feces. Although it has a unique therapeutic effect on the gastric cold syndrome 'xieri', its clinical application has been questioned because of its unique source and the unclear effective material basis. Helicobacter pylori (Hp) has been considered as the main pathogenic factor of gastric disease. From the perspective of inhibiting Hp, the research on the therapeutic effect of Har gaber towards the cold syndrome 'xieri' has drawn abroad attentions. Our previous study noted that Har gaber contains carbon nanostructures, which have the therapeutic effect on gastric disease by inhibiting Hp and its immune regulation mechanisms. Based on the structure feature of Har gaber, this project studies the therapeutic effect and immune regulatory mechanism of carbon nanostructure for the cold syndrome 'xieri', and then optimizes the processing technology to enhance the efficacy of the products, finally clear the effective material basis of Har gaber and explain the scientific of the Mongolia medicine processing theory. On this basis, we try to look for substitutes of ice sheet, solve the shortage of wild resources and ethical issues of fecal medicine, and provide theoretical guidance for its clinical application.

黑冰片是蒙、藏医药方剂中的常用药材，由干燥的野猪粪用闷煅法炮制。黑冰片对胃部寒性“协日”病有独特的疗效，但其来源独特、成分简单，且物质基础不明确，导致其临床应用受到质疑。幽门螺旋杆菌（Hp）感染是胃病的主要致病因素，从抑制Hp角度研究黑冰片制剂对寒性“协日”病的治疗作用已引起广泛关注。此外，通过激活自身免疫系统造成机体损伤也是Hp致病的重要因素。我们前期研究发现黑冰片中含有碳纳米结构，且碳纳米结构可通过Hp抑制和免疫调节机制对Hp引起的胃病起到治疗作用。基于黑冰片中具有碳纳米结构这一特征，本课题拟探讨黑冰片及碳纳米结构对Hp引起的寒性“协日”病的药效和免疫调节机制，进而通过优化炮制工艺来增强炮制品疗效，最终明确黑冰片的药效物质基础，解释其炮制理论的科学性。在此基础上寻找黑冰片的替代品，解决野生资源不足和粪便类药物的伦理学问题，并为其临床应用提供依据。

项目背景：黑冰片是蒙医治疗胃肠道疾病的常用药材，在蒙药方剂中大量使用。黑冰片的药效物质不明确以及粪便类药材入药的争议问题是其制剂现代化的瓶颈。.研究内容：本项目纳米结构角度提出了黑冰片中碳纳米结构在其药效发挥中起到了关键的作用。本项目从黑冰片药效物质发现和替代两个层面开展了系统研究，包括提取分离、结构表征、抗菌和免疫机制等实验。.研究结果和数据：1. 用差速离心技术提取了不同粒径的碳纳米颗粒，最佳提取液为30%乙醇溶液，离心机转速在6000-14000 r/min，离心时间5min可以分别获得粒径范围在1500-700nm，700-200 nm，200-100nm和100-20nm的样品。2. 随着碳纳米颗粒粒径的减小其抗菌能力增强。粒径在100-20nm的黑冰片纳米颗粒对三种细菌的MIC分别为：大肠杆菌0.625 mg/mL，铜绿假单胞菌0.3125 mg/mL，金黄色葡萄球菌0.3125 mg/mL；对三种细菌的MBC分别为：大肠杆菌0.3125 mg/mL，铜绿假单胞菌0.3125 mg/mL，金黄色葡萄球菌0.15625 mg/mL。3. 分离的碳纳米颗粒具有较好的荧光特性，并且随着碳纳米颗粒粒径减小其量子产率提高。4. 黑冰片中分离出的碳纳米颗粒呈片状，含有铁、镁、钙等元素掺杂。较小粒径的黑冰片纳米颗粒铁、钙、锌等离子含量提高，这对于其抗菌性能提升具有一定帮助。5. 用橡子仁和甘草模拟野猪消化过程和黑冰片炮制过程可以获得具有多孔碳和空心碳纳米球，产物具有较好的吸附性能。6. 药理学实验表明黑冰片与石墨烯的免疫调节功能是通过抑制乙醇诱导的基因转录或mRNA稳定性的变化来实现。.科学意义：本项目初步确定了黑冰片中的碳纳米颗粒在其胃肠道疾病治疗中抗菌和抗炎作用的药效物质基础作用；探索了野猪食性对黑冰片品质产生影响的内在机制；为蒙药黑冰片相关制剂的二次开发提供了大量的研究数据和理论支撑。