神经肽Y对吉兰巴雷综合征及实验性自身免疫性神经炎免疫网络的调控作用及机制研究

Macrophages, T helper cells and their cytokines are involved in the pathogenesis and development of Guillain-Barré syndrome (GBS) and experimental autoimmune neuritis (EAN). It is well known that the maintenance of functional homeostasis of human organism depends on interactions among the nervous, endocrine and immune systems. The nervous system could regulate the immune inflammatory response through sympathetic nerve and parasympathetic nerve. It is noteworthy that the sympathetic nerve, on the one hand, widely dominates the immune organs; on the other hand, it is the main source of neuropeptide Y (NPY) which cotransmission with catecholamines. Additionally, the receptors of NPY express on different kinds of immune cells, including macrophages and T helper cells. The binding of NPY and its receptors could regulate the immune responses. Therefore, we herein explore the role of NPY in GBS and EAN and the regulatory mechanism of NPY on the immune network by using the flow cytometry, ELISA, RT-PCR, cell co-culture, RNAi, etc. This work might contribute to further understanding of regulatory mechanism of NPY in GBS/EAN and provide new target for GBS.

巨噬细胞、辅助T细胞及相关细胞因子在吉兰-巴雷综合征（GBS）及其动物模型实验性自身免疫性神经炎（EAN）的发病、进展及恢复中构成了复杂的免疫网络。人体内所有的细胞、组织都受神经-内分泌-免疫网络系统的调控，三大系统相互调节，在维持机体功能稳态中发挥着重要作用。神经系统主要通过交感神经和副交感神经调节免疫炎症反应，交感神经不仅广泛支配着外周的免疫器官，同时是神经肽Y（NPY）的重要来源，NPY受体表达于不同的免疫细胞，参与调节免疫反应。因此。本项目拟采用流式细胞术、ELISA、RT-PCR、细胞共培养、基因沉默等技术，从临床观察、动物实验、体外实验三个层次，从整体、细胞、分子三个水平，探讨NPY 在GBS/EAN中免疫细胞和细胞因子构成免疫网络的调节作用及其作用机制；进而明确NPY对于GBS/EAN是否存在治疗作用，为未来GBS的治疗新方法提供理论依据及研究方向。

进一步探索 GBS 治疗新方法仍是神经病学亟待解决的问题。NPY 在哺乳动物的免疫功能调节作用以及一些神经退行性疾病及自身免疫性疾病的发生发展中的作用逐渐被揭示，如阿尔茨海默病、帕金森病、多发性硬化等，但目前尚无 NPY 在 GBS/EAN 中的作用及其对免疫网络调节作用机制的研究。本项目从临床和动物水平探究GBS患者外周血NPY表达水平以及NPY治疗 EAN动物模型的作用及机制。我们在进行本项目的同时，开展了另一课题即银杏内酯对GBS患者与EAN模型的作用及机制的研究，同时用超高效液相色谱-三级四级质谱仪检测炎症消散因子在神经免疫疾病中的表达水平。结果：（1）与健康对照组相比，GBS患者血浆中NPY显著升高。GBS 患者治疗前后血浆中NPY水平变化无显著性差异。（2）GBS患者血浆NPY水平与病情严重程度相关。（3）GBS患者血浆NPY水平与预后相关。（4）腹腔注射NPY可以减轻EAN症状，调节Th1 Th2 Th17 Treg细胞亚群的比例。（5）EAN 发病初期脾脏中巨噬细胞比例明显升高，其中 M1 型巨噬细胞增高明显，随着疾病的发展 M1 型巨噬细胞比例逐渐降低，M2 型巨噬细胞比例逐渐增高。（6）M2 型巨噬细胞回输可能通过抑制 NF-κB 信号通路从而降低 M1/M2 的比例和促炎性细胞因子的表达来缓解 EAN 的临床症状。（7）银杏内酯可改善EAN评分，延缓EAN小鼠的疾病高峰，下调小鼠脾脏单个核细胞悬液中Th细胞的比例.银杏内酯降低GBS患者外周血浆中的IFN-γ和IL-12 表达水平。（8）用超高效液相色谱-三级四级质谱仪检测炎症消散因子在神经免疫疾病中的表达水平，目前正处于预实验阶段，但我们初步可以检测到DHA在GBS外周血表达。该项目剩余的费用将用于该实验内容的继续探索。