DNA疫苗和蛋白质疫苗双重抗原信号诱导调节性DC的分子机制研究

调节性T细胞（Treg）在维持机体免疫耐受和控制炎症反应等方面发挥着重要作用。采用抗原专一性Treg诱导免疫耐受有着广泛的应用前景，但如何在体内诱导此类Treg细胞是当前研究的热点。本实验室在采用DNA疫苗与蛋白质疫苗"共免疫"增强免疫效果时发现，这种"共免疫"方式与单独免疫DNA疫苗或蛋白质疫苗相比，不但没有增强T细胞免疫效果，反而诱导机体产生了抗原专一性Treg细胞介导的免疫耐受，进一步证明是由于诱导产生了调节性DC（iDC）从而诱导Treg介导的免疫耐受。本课题在此基础上将研究DNA疫苗与蛋白质双重抗原信号与单一的抗原相比，是否改变了DC细胞上的膜受体相互作用关系或信号加工方式，并由此启动了不同的信号通路，从而导致行使正常抗原提呈功能的DC变成了iDC，并阐明"共免疫"诱导产生iDC的内在机理，分析和了解iDC如何诱导产生以及它如何发挥在免疫耐受中的作用有着十分重要的生物学意义。

抗原专一性Treg诱导免疫耐受有着广泛的应用前景。本实验室在采用DNA疫苗与蛋白质疫苗“共免疫”增强免疫效果时发现，这种“共免疫”方式诱导机体产生了抗原专一性Treg细胞介导的免疫耐受。本实验室前期工作证明：1）DNA疫苗表达的抗原一定要与共免疫使用的蛋白质一致；2）DNA疫苗与蛋白质疫苗有一个最佳比例；3)DNA和蛋白质注射到同一位点诱导免疫抑制的效果最佳。进一步探明其诱导产生免疫抑制的机理将为抗原诱导的免疫耐受问题得到一定的解释，并有助于解析抗原提呈过程中DC细胞对 DNA疫苗与蛋白质抗原信号处理的异同和相互作用关系，以及对免疫或耐受的影响,为利用免疫调节治疗自身免疫性疾病,以及解决疫苗打破免疫耐受等问题提供新的思路，此外,对共免疫诱导的免疫抑制机理的阐明可能对打破病毒感染过程中诱导的免疫抑制提供新的思路,为今后控制病毒感染过程起到积极作用。 在当年的申请书中我们提出的研究目标：“证明DNA疫苗与蛋白质疫苗双重抗原信号如何负调控CD40的表达，从而导致行使正常抗原提呈功能的DC变成了调节性DC”。拟解决的关键科学问题：1) 发现与DNA疫苗与蛋白质疫苗双重抗原相互作用的DC细胞膜受体；2) 筛选传递DC细胞膜受体信号的中间分子，并研究该分子如何开启胞内激活负调控NF-kB活性的信号通路。本实验室经过 4年的研究，初步验证了DNA与蛋白质双重抗原信号进入抗原提呈细胞（DC）的重要途径以及下游的通路。即DNA与蛋白质抗原可以通过Caveolae小体内吞后进入DC细胞，与Cav-1 等分子相互作用，从而调控下游负反馈信号途径TOLLIP、SOSC等分子，抑制了IRANK-1磷酸化和NF-kB入核等，从而抑制了CD40分子的表达，激活了IL-10和TGF-beta表达，最终使得DC细胞的状态成为调节型DC（DCreg），从而诱导naïve T细胞成为iTreg细胞的过程。本项目到目前为止发表了 9篇SCI论文，其有1篇论文发表在Journal of Immunology、1篇发表在European Journal of Immunology , 1篇Human Gene Therapy 同时还获得和申请了国内发明专利4项、国际发明专利6项。共培养了1名助教后升为副教授，博士后1人，博士生5人，硕士生2人 。经费使用情况按计划支出正常。